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三種成體干細(xì)胞對脂多糖誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞炎癥狀態(tài)的影響

發(fā)布時間:2017-07-26 22:23

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【摘要】:目的比較人羊膜上皮細(xì)胞((human amniotic epithelial cell,H-AEC))、羊膜間充質(zhì)細(xì)胞(human amniotic mesenchymal cell,HA-MSC)和臍帶間充質(zhì)細(xì)胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)分泌的細(xì)胞因子對脂多糖刺激巨噬細(xì)胞系RAW264.7炎癥狀態(tài)的影響。方法將LPS刺激的RAW264.7細(xì)胞炎癥模型作為對照組,比較H-AEC、HA-MSC、UC-MSC和RAW264.7共培養(yǎng)或條件培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7對RAW264.7炎癥狀態(tài)的影響。比較各組RAW264.7細(xì)胞的遷移能力;檢測各組細(xì)胞分泌一氧化氮(NO)的水平;用實時定量多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測各組細(xì)胞經(jīng)典激活的巨噬細(xì)胞(classically activated macrophage,M1 macrophage)相關(guān)的促炎基因如白介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死基因а(TNFа)、一氧化氮合成酶-2(NOS-2)以及M2 macrophage相關(guān)的抑炎基因如精氨酸酶(Arg-1)、甘露糖受體基因CD206、B類清道夫受體CD36)表達(dá)情況。結(jié)果 (1)H-AEC、HA-MSC、UC-MSC處理后RAW264.7的遷移率分別為14.7%±4.5%、9.6%±0.7%、13.0%±0.9%,與對照組(31.1%±11.0%)相比,3種細(xì)胞的條件培養(yǎng)基處理后RAW264.7的遷移率均降低,差異具有顯著性(P0.05);(2)H-AEC、HA-MSC、UCMSC共培養(yǎng)后RAW264.7細(xì)胞分泌NO的水平分別為24.26±0.72、44.52±2.51、42.25±0.76μmol/L,與對照組(45.65±1.78μmol/L)相比,H-AEC組細(xì)胞分泌的NO有顯著性下降(P0.05);(3)促炎基因與抑炎基因的表達(dá)改變:(A)H-AEC處理組促炎基因IL-1β、TNFа、NOS-2、INFβ的表達(dá)下調(diào),與對照組相比有顯著差別;HA-MSC、UC-MSC處理組促炎基因INFβ表達(dá)下調(diào)顯著,其余基因均上調(diào)表達(dá);抑炎相關(guān)基因如Arg-1、CD206、CD36均上調(diào);(B)3組細(xì)胞干預(yù)后抑炎癥相關(guān)基因Arg-1、CD206、CD36表達(dá)均上調(diào),與對照組有顯著差異。結(jié)論人羊膜上皮細(xì)胞、羊膜間充質(zhì)細(xì)胞和臍帶間充質(zhì)細(xì)胞可以促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M2型分化,但其效果和機制存在不同。
【作者單位】: 中南大學(xué)生殖與干細(xì)胞工程研究所;中南大學(xué)人類干細(xì)胞國家工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】羊膜上皮細(xì)胞 羊膜間充質(zhì)細(xì)胞 臍帶間充質(zhì)細(xì)胞 M型巨噬細(xì)胞 M型巨噬細(xì)胞
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30700272) 教育部新教師基金(20070533080) 湖南省科學(xué)基金(2009FJ3180) 長沙科技計劃(K1203005-31)~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 巨噬細(xì)胞可分為M1型巨噬細(xì)胞即經(jīng)典活化巨噬細(xì)胞和M2型巨噬細(xì)胞即旁路活化巨噬細(xì)胞,M1型巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子如腫瘤壞死因子(TNFа)、白介素1β(IL-1β)、誘導(dǎo)型氨合成酶(NOS-2)等,M2型巨噬細(xì)胞分泌抑炎因子如精氨酸酶(Arg-1)、甘露糖受體基因CD206等[1-2]。間充質(zhì)細(xì)胞(MSC)

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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4 李

本文編號:578650


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