本文關(guān)鍵詞：體外培養(yǎng)人羊膜上皮細(xì)胞的表型及分化能力

  更多相關(guān)文章： 組織構(gòu)建 組織工程 羊膜上皮細(xì)胞 體外培養(yǎng) SSEA- 羊膜上皮細(xì)胞標(biāo)志物 心肌樣細(xì)胞分化 國家自然科學(xué)基金

【摘要】：背景:人羊膜上皮細(xì)胞具有多系分化能力,是再生醫(yī)學(xué)中重要的細(xì)胞來源。目前的研究多集中于對(duì)其分化能力的考察,而體外培養(yǎng)過程中羊膜上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征如何變化尚不清楚。目的:分析體外培養(yǎng)對(duì)人羊膜上皮細(xì)胞生長、表型及向心肌樣細(xì)胞分化的能力等生物學(xué)特性的影響,探討原代人羊膜上皮細(xì)胞干性標(biāo)志物SSEA-4的表達(dá)水平與人羊膜上皮細(xì)胞生物學(xué)特性變化之間的關(guān)聯(lián)性。方法:使用統(tǒng)一分離方法獲得原代羊膜上皮細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng)。利用CCK-8、流式細(xì)胞儀及real-time PCR等手段檢測不同培養(yǎng)階段人羊膜上皮細(xì)胞的增殖、表型以及向心肌樣細(xì)胞分化的能力。結(jié)果與結(jié)論:不同胎兒樣本來源的原代人羊膜上皮細(xì)胞的SSEA-4表達(dá)在26.7%-97%,存在很大的個(gè)體差異。并且,隨著傳代次數(shù)的增加,人羊膜上皮細(xì)胞的SSEA-4表達(dá)水平顯著降低,其下降程度與原代SSEA-4的表達(dá)水平無關(guān)。另外,培養(yǎng)后人羊膜上皮細(xì)胞的心肌分化潛能也存在很大個(gè)體差異,且其差異與原代人羊膜上皮細(xì)胞的SSEA-4表達(dá)水平的高低無關(guān)。結(jié)果提示,不同胎兒樣本來源的原代人羊膜上皮細(xì)胞的SSEA-4表達(dá)水平受到個(gè)體差異的影響,需要建立更準(zhǔn)確的臨床樣本篩選指標(biāo)來穩(wěn)定獲得原代高表達(dá)SSEA-4的胎兒樣本,以實(shí)現(xiàn)對(duì)人羊膜上皮細(xì)胞的質(zhì)量監(jiān)控。另外,體外培養(yǎng)過程中SSEA-4的表達(dá)水平受到培養(yǎng)條件的影響,需要繼續(xù)優(yōu)化培養(yǎng)條件以維持其高表達(dá)。此外,人羊膜上皮細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的能力受到樣本個(gè)體差異以及培養(yǎng)條件的影響,在今后還需要進(jìn)一步研究。
【作者單位】： 大連醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院;中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所生物醫(yī)用材料工程組;中國科學(xué)院大學(xué);大連市婦產(chǎn)醫(yī)院;大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 組織構(gòu)建 組織工程 羊膜上皮細(xì)胞 體外培養(yǎng) SSEA- 羊膜上皮細(xì)胞標(biāo)志物 心肌樣細(xì)胞分化 國家自然科學(xué)基金
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31271055):模擬細(xì)胞微環(huán)境強(qiáng)化干細(xì)胞體外定向預(yù)分化體系的研究及其工程化構(gòu)建;國家自然科學(xué)基金(81101757):利于腫瘤干細(xì)胞擴(kuò)增的基質(zhì)剛度與乏氧微環(huán)境的構(gòu)建及調(diào)控;國家自然科學(xué)基金(21076207):細(xì)胞間質(zhì)體外模擬系統(tǒng)的構(gòu)建及物質(zhì)傳遞基本規(guī)律的研究 國家科技重大專項(xiàng)(2012ZX10002-011-013):肝癌細(xì)胞三維培養(yǎng)模型標(biāo)準(zhǔn)化構(gòu)建和規(guī)模化制備技術(shù)研究 大連市科學(xué)技術(shù)基金(2012J21DW029):體外腫瘤干細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立及應(yīng)用~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 文章亮點(diǎn):1實(shí)驗(yàn)分析了體外培養(yǎng)對(duì)羊膜上皮細(xì)胞表型以及分化能力的影響,探討原代羊膜上皮細(xì)胞干性標(biāo)志物SSEA-4的表達(dá)水平與體外培養(yǎng)后羊膜上皮細(xì)胞表型以及分化能力變化的關(guān)聯(lián)性。2結(jié)果提示需要建立臨床樣本篩選指標(biāo)以實(shí)現(xiàn)羊膜上皮細(xì)胞的質(zhì)量監(jiān)控;需要繼續(xù)優(yōu)化培養(yǎng)條件以維持

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：565697