發(fā)布時間：2017-06-20 03:03

  本文關鍵詞：體外擴增大鼠肌源性干細胞的安全性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究經體外擴增的大鼠肌源性干細胞的安全性,為將來肌源性干細胞移植治療壓力性尿失禁的臨床應用提供參考。方法:分離培養(yǎng)出大鼠肌源性干細胞,在體外傳代培養(yǎng),對傳至第10代(PP6-10)的細胞進行刀豆球蛋白A(ConA)凝聚實驗、雙層軟瓊脂培養(yǎng)實驗初步分析細胞表面結構和生長特性是否發(fā)生惡變;采用免疫細胞化學的方法檢測PP6-10的端粒酶活性以及c-myc,p53,c-fos腫瘤相關基因的表達情況;采用裸鼠皮下致瘤實驗觀察其是否具備致瘤性。結果:體外培養(yǎng)至第10代以內的大鼠肌源性干細胞在培養(yǎng)瓶底分布均勻,貼壁后多為紡錘形或梭形,與原代培養(yǎng)的肌源性干細胞形態(tài)相比無明顯改變;在不同濃度的ConA溶液中,PP6-10均未產生凝聚反應;將PP6-10置于雙層軟瓊脂中培養(yǎng)12d,未見細胞克隆形成,培養(yǎng)至20d,細胞數量明顯減少;通過免疫細胞化學方法檢測PP6-10中的c-myc,p53和c-fos等腫瘤相關基因的表達結果均為陰性,PP6-10中的端粒酶逆轉錄酶(hTERT)的表達結果呈弱陽性;將不同濃度的PP6-10接種于裸鼠皮下,觀察4個月后接種部位沒有腫塊形成,病檢其接種部位以及肝臟、肺臟均無異常表現。結論:大鼠肌源性干細胞體外培養(yǎng)至第10代后沒有發(fā)生突變,不具備體內致瘤性,初步證實了體外傳至第10代的大鼠肌源性干細胞的安全性。
【作者單位】： 武漢大學人民醫(yī)院;
【關鍵詞】： 肌源性干細胞 體外培養(yǎng) 致瘤性實驗
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 肌源性干細胞(muscle-derived stem cell,MD-SC),屬于成體干細胞的一種,不屬于間充質組織和肌源譜系,具有多項分化潛能[1]。本課題組前期研究證實[2],將大鼠MDSC注射到壓力性尿失禁的大鼠尿道周圍,可提高漏尿點壓力,之后有國外研究者將此方法成功用于人體實驗,取得很好的效果[

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本文編號：464374