真皮替代物是組織工程皮膚的重要組成部分。迄今尚未有能在體外產(chǎn)生彈性蛋白、形成彈性纖維這樣的真皮替代物的報(bào)道。本研究嘗試用大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(aortic smooth muscle cell，ASMC)作為種子細(xì)胞，用膠原—甲殼素—糖胺多糖(glycosaminoglycans，GAG)作為細(xì)胞外基質(zhì)，進(jìn)行三維培養(yǎng)構(gòu)建真皮替代物，并進(jìn)行體內(nèi)移植；采用醛復(fù)紅彈性染色和彈性蛋白免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)ASMC在三維培養(yǎng)和體內(nèi)移植后彈性纖維的產(chǎn)生情況。此外，還進(jìn)行了彈性纖維兩種染色方法的比較研究。 一、ASMC的三維培養(yǎng)研究：ASMC經(jīng)原代、傳代培養(yǎng)后，和膠原—甲殼素—GAG凝膠混合進(jìn)行三維培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)的細(xì)胞98％呈α肌動(dòng)蛋白免疫組化陽(yáng)性染色，表明為平滑肌細(xì)胞。經(jīng)三維培養(yǎng)(長(zhǎng)至2周)的ASMC凝膠中有彈性蛋白產(chǎn)生，并形成彈性纖維。 二、ASMC—膠原—甲殼素—GAG凝膠大鼠皮下移植的研究：植入后(長(zhǎng)至4周)，凝膠塊周圍未見(jiàn)明顯白細(xì)胞浸潤(rùn)，表明無(wú)排斥反應(yīng)發(fā)生；有宿主的血管及成纖維細(xì)胞長(zhǎng)入。凝膠中的ASMC不僅數(shù)量增多，而且呈現(xiàn)為合成功能活躍的形態(tài)，在移植7天時(shí)出現(xiàn)大量彈性纖維...

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1一1主動(dòng)脈壁(局部)醛復(fù)紅彈性染色x200

圖1一l主動(dòng)脈壁(局部)醛復(fù)紅彈性染色x200圖1一2主動(dòng)脈壁(局部)彈性蛋白免疫組化染色、蘇木精復(fù)染x200

圖1-2主動(dòng)脈壁(局部)彈性蛋白免疫組化染色、蘇木精復(fù)染X200

圖1-3士動(dòng)脈壁(局部)原彈性蛋白原位雜交、蘇木精復(fù)染X200

圖1-4貼塊蠟養(yǎng)的主動(dòng)脈中膜塊，示細(xì)胞從組織塊周圍遷出相差顯微鏡像

本文編號(hào)：3911837