目的:作為造血干細(xì)胞的新來源,臍血以其獨(dú)特的優(yōu)勢已廣泛應(yīng)用于移植治療、生物免疫治療、基因治療等領(lǐng)域。但由于單份臍血的采集量低,不足以滿足成人移植的需要,長期以來,研究者們一直在探索臍血干/祖細(xì)胞的有效分離、擴(kuò)增的方法。本課題旨在尋求一種簡便、高效、實(shí)用的臍血干/祖細(xì)胞的分離方法,并且對分離后的細(xì)胞進(jìn)行體外擴(kuò)增,來考察分離后的臍血干/祖細(xì)胞的增殖能力,探索擴(kuò)增后最佳的應(yīng)用時(shí)機(jī);同時(shí),比較有血清與無血清方法體外擴(kuò)增臍血干/祖細(xì)胞的異同,探究無血清方法臨床應(yīng)用的可能性。 方法:體外分離并培養(yǎng)臍血單個(gè)核細(xì)胞(MNC),計(jì)數(shù)MNC總數(shù)、流式細(xì)胞儀檢測CD34+細(xì)胞含量、混合集落生成單位(CFU-mix)培養(yǎng)觀察集落形成能力,驗(yàn)證臍血干/祖細(xì)胞分離和擴(kuò)增的效果。 1.將自行配制的比重為1.064g/L的蔗聚糖-泛影葡胺(Ficoll-hypaque)分離液與傳統(tǒng)的比重為1.077g/L淋巴細(xì)胞分離液密度梯度分離臍血,檢測上述指標(biāo),比較分離效果;2.用上述兩種分離液分離的臍血MNC進(jìn)行添加細(xì)胞因子(IL-3、SCF、GM-CSF)的為期三周的體外擴(kuò)增,并對擴(kuò)增后的細(xì)胞進(jìn)行上述指標(biāo)的檢測,觀察每周臍血...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1：1.064組新鮮臍血CFU-mix（×200）

圖2：1.077組新鮮臍血CFU-mix（×200）

圖3：1.064組擴(kuò)增7天時(shí)CFU-mix（×200）

圖4：1.064組擴(kuò)增14天時(shí)CFU-mix（×200）

本文編號：3911790