發(fā)布時(shí)間：2024-02-15 00:50

　　背景:在關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)環(huán)境中,軟骨細(xì)胞功能活躍,增殖速度加快,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)了軟骨細(xì)胞的表型維持,而且少量軟骨細(xì)胞提供的微環(huán)境能夠誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化,降低了軟骨分化過(guò)程中出現(xiàn)的肥大表型和軟骨內(nèi)骨化,但是影響共培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞增殖分化的因素和細(xì)胞間相互作用的機(jī)制尚不明確。目的:觀察軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞接觸共培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞增殖分化的影響,進(jìn)一步優(yōu)化共培養(yǎng)方式,為探討共培養(yǎng)系統(tǒng)中二者的相互作用機(jī)制提供依據(jù)。方法:分離和培養(yǎng)新西蘭兔(南京醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,取第2代軟骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以1∶3的比例直接混合在24孔板進(jìn)行接觸共培養(yǎng)為接觸共培養(yǎng)組,以1∶3比例分別在Transwell的上室和下室進(jìn)行非接觸共培養(yǎng)為非接觸共培養(yǎng)組,共培養(yǎng)21d。細(xì)胞爬片進(jìn)行甲苯胺藍(lán)染色、COL2a1及Cx43細(xì)胞免疫化學(xué)染色。應(yīng)用CCK8檢測(cè)共培養(yǎng)系統(tǒng)中細(xì)胞的增殖情況,ELISA檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞上清液中糖胺聚糖和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3水平,Western blot檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞COL2a1和Cx43的表達(dá)。然后添加轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3進(jìn)行軟骨細(xì)胞...

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
文章快速閱讀:
文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 BMSCs和ACs的分離培養(yǎng)和共培養(yǎng)
        1.4.2 ACs和BMSCs接觸共培養(yǎng)和非接觸共培養(yǎng)
        1.4.3 添加轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3進(jìn)行BMSCs和ACs接觸共培養(yǎng)和非接觸共培養(yǎng)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
        1.5.1 共培養(yǎng)后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化以及免疫化學(xué)染色檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞COL2a1和Cx43的表達(dá)
        1.5.2 CCK8試劑盒檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞的增殖情況
        1.5.3 ELISA法測(cè)定共培養(yǎng)系統(tǒng)中糖胺多糖和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3水平
        1.5.4 Western blot檢測(cè)共培養(yǎng)細(xì)胞COL2a1和Cx43的表達(dá)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 共培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài)變化
    2.2 ACs和BMSCs接觸共培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞增殖分化的影響
    2.3 外源性轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3對(duì)共培養(yǎng)細(xì)胞增殖分化的影響
3 討論Discussion



本文編號(hào)：3898905