SHIV是利用基因重組技術(shù)構(gòu)建的SIV／HIV嵌合病毒，SHIV被廣泛用于HIV基因功能和致病機(jī)理研究，SHIV／恒河猴還可做為HIV疫苗研究的動(dòng)物模型。國(guó)外科學(xué)家自上世紀(jì)80年代末開(kāi)始構(gòu)建SHIV，目前已有多株SHIV問(wèn)世，其中部分致病性較強(qiáng)的毒株已經(jīng)在抗HIV抗體中和活性評(píng)價(jià)和HIV疫苗攻毒實(shí)驗(yàn)中得到了初步應(yīng)用；但目前國(guó)內(nèi)還沒(méi)有SHIV的構(gòu)建報(bào)道。 在本研究中，首先利用從國(guó)外實(shí)驗(yàn)室獲得的含有SIVmac239 5′端1～6707個(gè)堿基的質(zhì)粒p239SpSp5′和含有SIVmac239 3′端6702～13068個(gè)堿基的質(zhì)粒p239SpE3′，經(jīng)SphI酶切后連接獲得完整的SIVmac239 DNA分子克隆。在分析了HIV-1 B模板中的tat／rev／env基因序列之后，以該序列內(nèi)部的HindⅢ酶切位點(diǎn)為界，采用巢式PCR方法分兩段擴(kuò)增了HIV-1 B的tat／rev／env基因。以分段擴(kuò)增產(chǎn)物的酶切連接產(chǎn)物為模板，重新設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增得HIV-1 B tat／rev／env全長(zhǎng)序列，經(jīng)NcoI和SphI雙酶切后，替換到p239SpE3′中，篩選鑒定得陽(yáng)性克隆子。然后，采取與構(gòu)...

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 SIVmac239provirus與SHIV的構(gòu)建
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    第一部分 小結(jié)
第二部分 SIVmac239的核心抗原的表達(dá)純化和單抗制備
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    第二部分 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄1:文獻(xiàn)綜述
附錄2:縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3861925