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聚合酶鏈反應(yīng)—單鏈構(gòu)象多態(tài)性技術(shù)鑒別結(jié)核分支桿菌利福平耐藥基因

發(fā)布時(shí)間:2023-11-08 17:53
  近年來(lái)受到人口流動(dòng)性增大、人口老齡化、過(guò)分依賴卡介苗、人類免疫缺陷病毒(HIV)與結(jié)核分枝桿菌共感染、毒品及女性吸煙等諸多因素的影響,結(jié)核病死灰復(fù)燃,全球呈大回升之勢(shì)。估計(jì)全球已有5000萬(wàn)人受耐藥結(jié)核分枝桿菌的感染。我國(guó)是疫情和耐多藥率高的國(guó)家,2000年全國(guó)流行病學(xué)調(diào)查(流調(diào))顯示初始耐藥率為18.6%,初始耐多藥(MDR,同時(shí)耐HK)率為7.6%。結(jié)核分枝桿菌耐藥性的產(chǎn)生和傳播更加劇了結(jié)核病的流行。利福平(RFP)作為抗結(jié)核一線藥物,結(jié)核分枝桿菌對(duì)其耐藥發(fā)生率高達(dá)90%以上,其耐藥性產(chǎn)生是由于其作用靶分子RNA多聚酶的β亞單位的編碼基因rpoB突變所致。這類突變屬于單堿基錯(cuò)義突變,主要發(fā)生在核糖核酸多聚酶的β亞基(rpoB基因),而且突變集中在約81個(gè)堿基長(zhǎng)度的DNA區(qū)段內(nèi),故通過(guò)PCR-SSCP技術(shù)可將97%以上的利福平耐藥株快速鑒別出來(lái)。PCR-SSCP技術(shù)對(duì)利福平耐藥性的檢測(cè)具有快速、操作簡(jiǎn)便、易行的特點(diǎn),并使應(yīng)用傳統(tǒng)耐藥測(cè)定方法耗時(shí)1~2個(gè)月縮短到2天內(nèi)即可完成。因此PCR-SSCP可快速檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌rpoB基因突變,適用于結(jié)核分枝桿菌臨床分離株的快速檢測(cè)。 由于一般...

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