IL-18在原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中的表達(dá)和純化
發(fā)布時(shí)間:2023-10-02 02:30
白介素18(IL-18)是新發(fā)現(xiàn)的一種白介素類細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn):該因子除可以誘導(dǎo)生成IFN-(外,還可與許多細(xì)胞因子相互作用,參與機(jī)體免疫反應(yīng)過(guò)程,對(duì)機(jī)體起著重要的免疫調(diào)節(jié)和保護(hù)作用。IL-18主要的生物學(xué)活性表現(xiàn)在以下幾方面:1)宿主防御功能;2)抗腫瘤免疫;3)前炎因子活性;4)抗變態(tài)反應(yīng)性疾病作用。因此,探討IL-18不論對(duì)基礎(chǔ)研究,還是對(duì)臨床運(yùn)用方面都具有重要價(jià)值。目前,國(guó)內(nèi)外主要集中于IL-18與臨床疾病的研究上,IL-18基因的表達(dá)、純化絕大多數(shù)局限于原核表達(dá)。國(guó)內(nèi)研究IL-18在原核表達(dá)體系的表達(dá)、純化的學(xué)者不多,對(duì)IL-18在真核表達(dá)體系中的表達(dá)、純化尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究旨在探討IL-18在原核細(xì)胞及真核細(xì)胞中表達(dá),并探索優(yōu)化的純化方法。為以后IL-18的基礎(chǔ)研究和臨床運(yùn)用研究奠定良好的基礎(chǔ)。 第一部分:IL-18在大腸桿菌ER2566中的表達(dá)和純化。利用原核表達(dá)體系,是研究IL-18的表達(dá)和純化的第一階段。通過(guò)PCR擴(kuò)增出IL-18基因,構(gòu)建原核表達(dá)載體pTYB1IL-18,轉(zhuǎn)化入Hananhan法制備的大腸桿菌ER2566超感受態(tài)細(xì)胞中,然后誘導(dǎo)表達(dá)。經(jīng)過(guò)調(diào)整溫度、...
【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫表
中文摘要
英文摘要
正 文
前 言
第一部分 IL-18在原核表達(dá)細(xì)胞中表達(dá)和純化
材料儀器
方 法
結(jié)果與討論
參考文獻(xiàn)
第二部分 IL-18在真核細(xì)胞中的表達(dá)和純化
第一節(jié) pPIC9IL-18載體在酵母中的表達(dá)
材料儀器
方 法
結(jié)果與討論
第二節(jié) pPIC9KIL-18載體的構(gòu)建
材料儀器
方 法
結(jié)果與討論
參考文獻(xiàn)
第三部分 IL-18的活性測(cè)定
材料儀器
方 法
結(jié)果與討論
參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
綜 述
白介素-18與臨床疾病相關(guān)性研究進(jìn)展
IL-18研究進(jìn)展
致 謝
研究生在讀期間發(fā)表及待發(fā)表的文章
本文編號(hào):3849917
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