MLL基因的異常重排會(huì)引發(fā)急性淋巴系(ALL)和急性髓系白血病(AML)。該文詳細(xì)闡述了利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體MLL-AF9構(gòu)建小鼠AML模型的方法。該研究比較了免疫磁珠法與5-氟尿嘧啶(5-FU)方法富集骨髓細(xì)胞的效率,以及不同時(shí)間點(diǎn)收獲的病毒對(duì)骨髓Lin-細(xì)胞感染效率的影響。通過(guò)流式檢測(cè)發(fā)現(xiàn), 5-氟尿嘧啶富集的骨髓Lin–細(xì)能夠被48 h收獲的病毒高效感染。受體鼠在移植了MLL-AF9感染的骨髓Lin–細(xì)胞60天后,外周血、骨髓、脾臟組織中均有大量的白血病細(xì)胞浸潤(rùn), RT-qPCR也驗(yàn)證了白血病靶基因的表達(dá)上調(diào),表明小鼠AML模型的成功構(gòu)建。這項(xiàng)研究為從事白血病研究的科研人員提供了一種有效的小鼠急性髓系白血病模型,為研究白血病發(fā)病機(jī)理與研發(fā)白血病治療藥物提供有用的工具。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 試劑
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠骨髓細(xì)胞的獲取
        1.2.2 小鼠骨髓Lin-細(xì)胞富集
        1.2.3 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝
        1.2.4 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染骨髓Lin–細(xì)胞
        1.2.5 骨髓移植
        1.2.6 組織石蠟切片與染色
2 結(jié)果
    2.1 不同方法富集的Lin–細(xì)胞對(duì)感染效率的影響
    2.2 不同時(shí)間收獲的病毒對(duì)感染效率的影響
    2.3 白血病建模觀察
    2.4 組織病理檢測(cè)
    2.5 RT-qPCR檢測(cè)MLL-AF9相關(guān)靶基因的表達(dá)情況
3 討論



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