登革熱是由登革病毒引起的蚊媒病毒病，每年全世界登革熱患者達(dá)一億。目前對(duì)于該病尚缺乏安全有效的疫苗。登革病毒是單股正鏈RNA病毒，基因組全長(zhǎng)約11Kb，含有單一開(kāi)放讀碼框架。登革病毒膜蛋白前體prM和包膜蛋白E及非結(jié)構(gòu)蛋白NS1均含有多種抗原表位，因此這些特異的病毒蛋白為登革新型疫苗的主要靶標(biāo)。 DNA疫苗可以刺激動(dòng)物產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫。但是通常DNA疫苗的免疫原性較弱。將多種DNA疫苗混合后共同免疫將提供針對(duì)多種抗原表位的免疫應(yīng)答，并有可能提高疫苗的免疫原性。本研究采用RT-PCR法獲得了登革3型病毒的prME和NS1基因片段，分別將其插入真核表達(dá)載體pcDNA6／V₅·His-B，C，構(gòu)建了兩個(gè)真核表達(dá)重組質(zhì)粒。將構(gòu)建的重組質(zhì)粒DNA分別轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞后用免疫熒光法可檢測(cè)到外源蛋白的表達(dá)。然后將兩種重組質(zhì)粒DNA以混合及單獨(dú)形式分別免疫BALB／C小鼠，免疫的小鼠可產(chǎn)生中和抗體和特異性CTL。在末次免疫后第33天，雙質(zhì)粒重組DNA組與prME重組質(zhì)粒DNA組的中和抗體水平均可達(dá)到1：32。在術(shù)次免疫后第41天，當(dāng)效靶比為40：1時(shí)，雙質(zhì)粒重組DNA免疫...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
前言
第一部分 我國(guó)登革3型病毒prME和NS1基因重組質(zhì)粒DNA的構(gòu)建與表達(dá)
    一、 登革3型病毒prME基因重組質(zhì)粒DNA的構(gòu)建與表達(dá)
    二、 登革3型病毒NS1基因重組質(zhì)粒DNA的構(gòu)建與表達(dá)
第二部分 登革3型病毒prME和NS1多基因重組質(zhì)粒DNA免疫原性增強(qiáng)效果的觀察
第三部分 登革3型病毒prME和NS1多基因重組質(zhì)粒DNA免疫保護(hù)效果的初步觀察
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
在讀期間發(fā)表論文(全文)
致謝



本文編號(hào)：3754542