艾滋�。ˋIDS）是本世紀(jì)末肆虐人類的一種嚴(yán)重傳染病，已確定其病原為人免疫缺陷病毒（HIV）。對于艾滋病，目前尚無有效的治療藥物，因此，研究HIV疫苗對于AIDS的預(yù)防和治療具有重要意義。HIV-1 gag P17／P18和P24／P25是具有潛力的HIV候選疫苗，英國政府批準(zhǔn)進(jìn)入人體試驗(yàn)的兩種艾滋病疫苗，一個(gè)是P24-VLP，另一個(gè)是P17／P18蛋白上的一段多肽HGP30。本文應(yīng)用體外擴(kuò)增技術(shù)定向克隆和表達(dá)以HPG30序列為中心的一段包括大部分P18和小部分P25的多肽（P20蛋白），對于研制新的HIV疫苗具有一定的意義。 為開展HIV分子生物學(xué)研究工作，我們于88年從美國引入一株HIV-1病毒ARV-2的全基因組克隆。為便于工作，本文將ARV-2基因組 

【文章頁數(shù)】：122 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
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英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
    Ⅰ．聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及其應(yīng)用
    Ⅱ．HIV復(fù)制調(diào)控研究進(jìn)展
    Ⅲ．HIV疫苗研究概況
    參考文獻(xiàn)
第一部分 HIV-I基因組DNA的亞克隆
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二、實(shí)驗(yàn)方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 HIV-I gag基因片段的體外擴(kuò)增和定向克隆
    材料與方法
        一、材料
        二、方法
    結(jié)果
        一、P20基因的體外擴(kuò)增
        二、P20基因的克隆
        三、P20基因插入M13 mp18
        四、P20基因序列分析
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 P20基因在大腸桿菌中的表及其表達(dá)產(chǎn)物的純化和鑒定
    材料與方法
        一、材料
        二、方法
    結(jié)果
        一、重組表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建
        二、P20基因在大腸桿菌中的表達(dá)
        三、P20蛋白的抗原活性
        四、P20蛋白的純化
    討論
    參考文獻(xiàn)
第四部分 應(yīng)用PCR技術(shù)直接擴(kuò)增HIV-1 gag基因序列的實(shí)驗(yàn)研究
    材料與方法
        一、材料
        二、方法
    結(jié)果
        一、PCR對HIV-1 gag靶基因片段的特異性擴(kuò)增作用
        二、PCR方法檢測HIV-1基因的敏感性
        三、循環(huán)次數(shù)對PCR產(chǎn)物的影響
        四、PCR定量檢測HIV-1基因
    討論
    參考文獻(xiàn)
小結(jié)
致謝



本文編號：3705871