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三種基因治療靶細(xì)胞的分離與體外培養(yǎng)

發(fā)布時(shí)間:2022-11-11 23:07
  基因治療(gene therapy)是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)迅速發(fā)展和結(jié)合的產(chǎn)物,從基因水平上對遺傳病和腫瘤進(jìn)行治療已成為醫(yī)學(xué)發(fā)展的必然趨勢和人類健康的迫切需求。目前基因治療面臨著三個(gè)方面的主要問題:1、安全的載體。2、高效的轉(zhuǎn)染方法。3、適宜的靶細(xì)胞。夏家輝院士于1981年在對兩個(gè)正常人家系的研究分析中發(fā)現(xiàn)一種罕見的雙隨體小染色體(bisatellite microchromosome BM)不僅能獨(dú)立于46條染色體之外穩(wěn)定遺傳,而且對人體無任何危害。在此基礎(chǔ)上我們利用BM特異性片段構(gòu)建了D、G組染色體短臂導(dǎo)向的基因打靶載體—人源基因載體,并成功地利用該載體將外源基因定點(diǎn)導(dǎo)入基因組中D、G組染色體短臂的安全靶位點(diǎn),外源基因的有效、穩(wěn)定表達(dá),證明了人源基因載體可作為一種安全、理想的基因治療載體。該基因治療載體成功地避免了病毒載體面臨的一系列安全性的問題。 間接體內(nèi)法(ex vivo),是目前較常使用的一種基因治療方法,該方法在體外將基因?qū)霃娜梭w取出培養(yǎng)的靶細(xì)胞,再將這種基因修飾過的細(xì)胞輸回體內(nèi)進(jìn)行表達(dá),達(dá)到治療目的。此法與直接體內(nèi)療法相比,其突出的優(yōu)點(diǎn)是帶有... 

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)儀器及所用試劑
第一部分 成人皮膚成纖維細(xì)胞的分離和體外培養(yǎng)的安全性實(shí)驗(yàn)研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 成人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的分離與原代無血清培養(yǎng)
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 成人成肌細(xì)胞的初步分離與體外培養(yǎng)
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第四部分 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述 皮膚細(xì)胞基因治療的研究進(jìn)展
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間主要的研究成果


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]連續(xù)傳代人胚骨骼肌成肌細(xì)胞生物學(xué)特性研究[J]. 岑石強(qiáng),楊志明,解慧琪,李勝富.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2000(06)
[2]表皮干細(xì)胞[J]. 孫曉慶,付小兵,盛志勇.  中華創(chuàng)傷雜志. 2000(10)
[3]成肌細(xì)胞在基因治療和組織工程中的應(yīng)用綜述[J]. 岑石強(qiáng),楊志明.  中國修復(fù)重建外科雜志. 1999(03)



本文編號(hào):3705918

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