人類最偉大的成就之一就是發(fā)展疫苗控制傳染性疾病。艾滋病肆虐二十余年至今仍未有有效手段對(duì)其預(yù)防及治療,越來(lái)越多的證據(jù)顯示CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的CTL（Cytotoxic T Lymphocytes）在控制艾滋病病毒感染中起舉足輕重的作用,但是產(chǎn)生細(xì)胞免疫對(duì)疫苗學(xué)而言是一個(gè)復(fù)雜而艱巨的課題,它包括刺激產(chǎn)生的免疫細(xì)胞的強(qiáng)度,長(zhǎng)效性以及解剖學(xué)分類等一系列問(wèn)題,近期研究表明連續(xù)使用不同抗原呈遞體系（heterologous boosting）,即通常所指的“prime-boost”免疫策略,可以刺激高水平的記憶性T細(xì)胞的產(chǎn)生,給艾滋病疫苗的研制帶來(lái)了新的希望。本研究以小鼠為動(dòng)物模型,使用表達(dá)HIV-1 Gag-Pol基因的DNA疫苗、重組禽痘病毒、重組痘苗病毒、重組腺病毒之間的不同配伍,對(duì)HIV疫苗的“prime-boost”免疫策略進(jìn)行研究。結(jié)果表明:1) rFPV、rMVA、rAD5三種重組病毒單獨(dú)免疫后引起的體液及細(xì)胞免疫反應(yīng)強(qiáng)度依次增加。2)DNA prime/重組病毒boost免疫策略中,rAD5加強(qiáng)所引起的免疫反應(yīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)另兩種重組病毒。3)不同重組病毒的搭配中,rAD5 prime/... 

【文章頁(yè)數(shù)】：113 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
第一章 前言
    第一部分 艾滋病疫苗的研究現(xiàn)狀
        一、HIV 病毒概述
            1. HIV 流行情況
            2. HIV 病毒的分型
            3. HIV 的感染機(jī)制
            4. HIV 病毒的分子生物學(xué)
            5. HIV 病毒的復(fù)制周期
        二、HIV 疫苗可行性研究及構(gòu)建策略與形式
            1. HIV 疫苗的可行性
            2. HIV 疫苗的構(gòu)建策略
            3. HIV 疫苗的幾種不同形式
    第二部分 Prime-boost 免疫策略及HIV疫苗臨床情況
        一、prime-boost免疫策略概述
        二、HIV 疫苗臨床情況
    第三部分 本論文的設(shè)計(jì)方案
第二章 材料和方法
    第一部分 HIV-1 抗原選擇及 DNA 疫苗的構(gòu)建
        一、目的基因的獲得
        二、HIV-1 DNA 疫苗的構(gòu)建、鑒定
        三、HIV-1 DNA 疫苗在真核細(xì)胞中的表達(dá)分析
    第二部分 rFPV 的構(gòu)建及不同啟動(dòng)子的比較
        一、rFPV 的構(gòu)建
        二、rFPV 抗原體外表達(dá)鑒定及比較
        三、兩株rFPV體液及細(xì)胞免疫的比較
    第三部分 rMVA 的擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定
        一、rMVA 的擴(kuò)增
        二、rMVA 的純化
        三、rMVA 滴度的測(cè)定
        四、rMVA 抗原體外表達(dá)鑒定
    第四部分 rAD5 的擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定
        一、rAD5 的擴(kuò)增
        二、rAD5 的純化
        三、rAD5 的滴度測(cè)定
        四、rAD5 抗原體外表達(dá)鑒定
    第五部分 prime-boost 免疫策略的研究
        一、不同重組病毒單針免疫效果的比較
        二、DNA 疫苗初免不同形式重組病毒加強(qiáng)免疫效果的比較
        三、不同重組病毒間的配伍
        四、HIV 疫苗最佳免疫策略的研究
        五、rAD5/rMVA 策略中不同免疫間隔的比較
第三章 結(jié)果與討論
    第一部分 DNA 疫苗的構(gòu)建
        一、D-GP 質(zhì)粒圖譜說(shuō)明
        二、載體酶切鑒定
        三、HIV gag-pol 插入片斷序列測(cè)定
        四、DNA 疫苗抗原性分析
        五、小結(jié)
    第二部分 rFPV 的構(gòu)建及不同啟動(dòng)子效率的比較
        一、穿梭質(zhì)粒s-plw22 與s-psc11 的構(gòu)建
        二、重組穿梭質(zhì)粒的構(gòu)建
        三、FPV與重組穿梭質(zhì)粒的同源重組及rFPV的篩選
        四、rFPV 的滴度測(cè)定
        五、rFPV 插入序列的鑒定
        六、兩株rFPV 抗原表達(dá)研究及比較
        七、兩株rFPV 體液及細(xì)胞免疫的研究與比較
        八、小結(jié)
    第三部分 rMVA、rAD5 的擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定
        一、rMVA 的擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定
        二、rMVA 抗原性分析
        三、rAD5 的擴(kuò)增、純化及滴度測(cè)定
        四、rAD5 抗原性分析
    第四部分 prime-boost 免疫策略的研究
        一、不同重組病毒單針免疫效果的比較
        二、DNA 初免不同重組病毒加強(qiáng)免疫效果的比較
        三、不同劑量重組腺病毒免疫效果的比較
        四、不同重組病毒間的配伍
        五、最佳免疫策略的研究
        六、不同免疫間隔的研究
        七、小結(jié)
    第五部分 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
中文摘要
英文摘要
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]艾滋病研究進(jìn)展[J]. 裘炯良,鄭劍寧,趙玉婉.  檢驗(yàn)檢疫科學(xué). 2003(01)
[2]艾滋病研究進(jìn)展[J]. 胡國(guó)齡.  實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué). 2000(03)



本文編號(hào)：3652613