目的:1.心肌缺氧/復氧損傷是多因素所致的復合性損傷,但其具體機制仍不清。本文旨在探討氧自由基在乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷中的作用。2.研究表明,鈣離子超載參與了心肌缺氧/復氧損傷,本文通過觀察細胞內(nèi)鈣離子濃度在乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷中的變化,顯示鈣離子超載在心肌缺氧/復氧損傷中的作用。3.探討還原型谷胱甘肽（GSH）作為一種自由基清除劑及鈣離子拮抗劑,對缺氧/復氧培養(yǎng)乳鼠心肌細胞損傷的保護作用。方法:取出生1～3天的Wistar大鼠,剪取心尖部組織,將心肌剪成約0.5～1mm³大小的碎塊,用0.25%胰酶消化4～5次,收集除第一次消化后的上清液,將收集到的上清液在4℃、500r/min的速度下離心10min,棄去上清液,用平衡鹽溶液洗滌細胞。然后用DMEM培養(yǎng)基配制成細胞懸液。應用差速貼壁法分離純化心肌細胞。將原代培養(yǎng)的乳鼠心室肌細胞分為正常對照組與還原型谷胱甘肽不同濃度處理組。將正常培養(yǎng)72小時后的心肌細胞換用缺氧缺糖DMEM培養(yǎng)基,培養(yǎng)板放入充有99.5%N₂的密閉容器中,37℃密閉培養(yǎng)2h。將缺氧的心肌細胞換用飽含95%O

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

還原型谷膚甘膚對培養(yǎng)缺氧/復氧損傷心肌細胞的培養(yǎng)液

還原型谷膚甘膚對培養(yǎng)缺氧/復氧損傷心肌細胞的培養(yǎng)液中SOD的影響(均值)對MDA的影響如表2和圖2(均值的直方圖)，對照組缺氧2小時和復氧1小時相比(尸>0.05)。模型組復氧1小時后心肌細胞培養(yǎng)液中MDA的含量明顯多于缺氧2小時(尸<0.01)。GSH4Omg/L組與模型組MDA含量差別沒有統(tǒng)計學意義(尸>0.05)。GSHSOmgL/組和GSH16OmgL/組缺氧2小時與復氧1小時時心肌細胞培養(yǎng)液中MDA的含量差別不明顯(尸>0.05);在缺氧2小時，與模型組相比，各藥物組均可見培養(yǎng)液中MDA的含量明顯降低(尸<0.01)。在復氧1小時，與模型組相比，GSH4OmgL/組無明顯差別(尸>.005)，余藥物組MDA的含量均明顯降低(尸<0.01)。

還原型谷耽甘膚對培養(yǎng)缺氧/復氧損傷心肌細胞中游離鈣aZ+，

【參考文獻】：
期刊論文
[1]活性氧自由基對心肌細胞損傷效應研究[J]. 林灼鋒,李校坤,孟娟.  中國生物工程雜志. 2004(06)
[2]刺五加葉皂苷對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用[J]. 睢大員,曲紹春,于小風,陳燕萍,馬興元.  中國中藥雜志. 2004(01)
[3]新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)技巧[J]. 王濤,余志斌,謝滿江,車紅磊.  第四軍醫(yī)大學學報. 2003(02)
[4]原代心肌細胞培養(yǎng)方法的探討[J]. 董豐,龔開政,張振剛,王波,呂申.  大連醫(yī)科大學學報. 2001(04)
[5]缺氧-復氧對培養(yǎng)的大鼠心肌細胞損傷與細胞凋亡的影響[J]. 姚震,馮建章,符永恒,陳顏芳,耿慶山,周穎玲.  嶺南心血管病雜志. 2000(01)
[6]一氧化氮及其合酶在心肌缺血再灌注損傷中作用的研究[J]. 崔世濤,朱洪生.  中華胸心血管外科雜志. 1999(06)
[7]心肌細胞Na+-Ca2+交換電流[J]. 梁勇,王曉良.  生理科學進展. 1999(02)
[8]在體外乳鼠心肌細胞缺氧的損傷及利多卡因的保護作用[J]. 杜敏逸,紀方,吳新民.  中華麻醉學雜志. 1999(03)
[9]黃芪皂甙對培養(yǎng)心肌細胞缺氧復氧損傷保護作用的電鏡觀察[J]. 張?zhí)煲?李靖,顧君一,林琳.  臨床與實驗病理學雜志. 1997(04)
[10]細胞粘附分子與心肌缺血－再灌注損傷[J]. 王長謙.  國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊). 1996(02)



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