本文關(guān)鍵詞：硫化氫通過(guò)上調(diào)SIRT1拮抗同型半胱氨酸誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討硫化氫(Hydrogen sulfide,H2S)是否可以通過(guò)上調(diào)SIRT1拮抗同型半胱氨酸誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老。方法:Cell counting Kit-8(CCK8)法檢測(cè)細(xì)胞的活性;β-半乳糖苷酶染色法(Senescence Associated acidic-β-Galactosidase SA-β-Gal)、臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)求細(xì)胞生長(zhǎng)曲線及Western Blotting檢測(cè)細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白的表達(dá)評(píng)價(jià)HT22細(xì)胞衰老;Western Blotting檢測(cè)沉默信息調(diào)節(jié)因子1(Silent mating type information regulation homolog 1,SIRT1)蛋白的表達(dá);羅丹明123(Rh123)染色熒光顯微鏡照相檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位;Annexin V/PI染色流式細(xì)胞儀和Hoechst33258染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.Hcy(2.5、5、10 mmol/L)處理HT22細(xì)胞48h后,SA-β-Gal陽(yáng)性細(xì)胞明顯增加,衰老負(fù)性調(diào)控蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白表達(dá)明顯上調(diào),細(xì)胞生長(zhǎng)曲線明顯呈下降趨勢(shì),表明Hcy能誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老。2.Na HS(H2S供體,100、200、400μmol/L)可呈濃度依賴性地抑制Hcy(5 mmol/L,48 h)誘導(dǎo)HT22細(xì)胞SA-β-Gal染色陽(yáng)性細(xì)胞增加,P16INK4a、P21CIPL蛋白表達(dá)上調(diào)及細(xì)胞生長(zhǎng)曲線下降趨勢(shì),表明H2S可拮抗Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老。3.Hcy(2.5、5、10mmol/L)處理HT22細(xì)胞48小時(shí)后,細(xì)胞SIRT1蛋白的表達(dá)呈濃度依賴性下調(diào),表明Hcy可抑制HT22細(xì)胞SIRT1蛋白的表達(dá)。4.Na HS(100、200、400μmol/L,48h)可濃度依賴性地上調(diào)HT22細(xì)胞SIRT1蛋白的表達(dá),而且可逆轉(zhuǎn)Hcy(5 mmol/L)處理HT22細(xì)胞后SIRT1蛋白表達(dá)的下調(diào)作用,表明H2S可上調(diào)HT22細(xì)胞SIRT1的表達(dá)。5.SIRT1抑制劑Sirtinol(15μmol/L)可逆轉(zhuǎn)Na HS(400μmol/L)對(duì)Hcy(5 mmol/L,48 h)增加HT22細(xì)胞中SA-β-Gal染色陽(yáng)性細(xì)胞比例、上調(diào)衰老相關(guān)關(guān)鍵蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白表達(dá)以及促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線下降趨勢(shì)的阻斷作用,表明SIRT1對(duì)H2S抑制Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老具有介導(dǎo)作用。結(jié)論:H2S通過(guò)上調(diào)SIRT1拮抗Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老。
【關(guān)鍵詞】：硫化氫 同型半胱氨酸 細(xì)胞衰老 SIRT1
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R339.38
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 主要英文縮略語(yǔ)索引9-11
• 第一章 緒論11-15
• 第二章 材料和方法15-23
• 2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑16-17
• 2.3 試劑的制備17-19
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-23
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-29
• 3.1 Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞的衰老23-24
• 3.2 H_2S拮抗Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞衰老24-25
• 3.3 Hcy抑制HT22細(xì)胞SIRT1的表達(dá)25
• 3.4 H_2S上調(diào)HT22細(xì)胞SIRT1的表達(dá)25-26
• 3.5 SIRT1抑制劑(Sirtinol)阻止H2S抗Hcy誘導(dǎo)的HT22細(xì)胞衰老26-27
• 3.6 SIRT1抑制劑(Sirtinol)逆轉(zhuǎn)H2S抗Hcy誘導(dǎo)HT22細(xì)胞凋亡27-29
• 第四章 討論29-33
• 第五章 實(shí)驗(yàn)結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 文獻(xiàn)綜述38-46
• 參考文獻(xiàn)43-46
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果46-47
• 致謝47

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