發(fā)布時間：2021-12-27 18:25

　　漢坦病毒是一種有囊膜、分節(jié)段的單股負鏈RNA病毒，基因組由L、M、S三個片段構(gòu)成。L片段編碼病毒RNA聚合酶，M片段編碼囊膜糖蛋白G1和G2，S片段編碼核衣殼蛋白NP（簡稱核蛋白）。囊膜糖蛋白上具有中和及血凝抗原位點，可誘導(dǎo)中和抗體和保護性細胞免疫反應(yīng)；核蛋白上雖無中和性抗原位點，但仍可誘導(dǎo)保護性細胞免疫。 血清學(xué)研究表明，漢坦病毒核蛋白具有很強的抗原性和免疫原性，病人對核蛋白的抗體應(yīng)答不僅出現(xiàn)早，且滴度高。進一步研究發(fā)現(xiàn)，核蛋白N端約100個氨基酸大部分具有親水性，且能被病人、免疫動物血清及許多單克隆抗體所識別，運用缺失突變法表達的漢坦病毒核蛋白N端多肽保持了天然完整NP良好的抗原性和免疫原性，已用于腎綜合征出血熱和漢坦病毒肺綜合征的血清學(xué)診斷，但該抗原表位精確的一級結(jié)構(gòu)及其基因定位迄今尚未明確。噬菌體表面呈現(xiàn)技術(shù)的出現(xiàn)為大量快速地篩檢基因——多肽文庫提供了可能。 本研究首先采用噬菌體表面呈現(xiàn)技術(shù)建立了漢坦病毒代表株漢灘病毒76-118株S基因隨機多肽片段的噬菌體文庫，用單克隆抗體對其進行篩檢，確定了漢灘病毒核蛋白的主要線性抗原表位，并在此基礎(chǔ)上。用pGEX融合蛋白表達 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖SA噬菌體表位文庫構(gòu)建與篩選示意圖

圖SB噬菌體表位文庫構(gòu)建與篩選示意圖

一l漢灘病毒S片段薈因的曲切回收Figl一1HTNV一5gene五5eut初thPSt1fro.pUC18一HTN一5andeolleetedLanel:入DNAHind111Marker(23130，9416，6557，4361，2322，2027，564bP)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]應(yīng)用噬菌體肽庫技術(shù)對漢灘病毒核衣殼蛋白N端主要線性抗原位點的識別及其基因定位[J]. 白雪帆,黃長形,汪毅,潘蕾,楊為松.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 1998(06)
[2]漢灘病毒S片段基因cDNA 3′端非編碼區(qū)對核蛋白在大腸桿菌中表達的影響[J]. 黃長形,楊為松,杭長壽,白雪帆,李光玉,李新紅,孫永濤,張文彬.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1997(04)
[3]噬菌體表面表達技術(shù)及其在抗病毒研究中的應(yīng)用現(xiàn)狀和前景[J]. 張英,李愛民.  病毒學(xué)報. 1997(02)
[4]漢灘病毒核蛋白在大腸桿菌中高效表達[J]. 李新紅,楊為松,黃長形,白雪帆,李光玉,張文彬.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 1997(03)
[5]原核細胞表達的腎綜合征出血熱病毒核蛋白免疫原性及免疫保護作用的研究[J]. 黃長形,李光玉,楊為松,杭長壽,白雪帆,孫永濤,張文彬,李新紅.  中國病毒學(xué). 1996(03)
[6]腎綜合征出血熱病毒核蛋白在大腸桿菌中表達及其產(chǎn)物的初步應(yīng)用[J]. 黃長形,李盈盈,楊為松,杭長壽,白雪帆,尚高峰,張文彬.  中華傳染病雜志. 1996(01)
[7]漢灘病毒毒力標志的建立[J]. 邱建明,宋干,杭長壽,張全福,霍子威,桃樹元.  病毒學(xué)報. 1995(04)
[8]重組桿狀病毒表達漢坦病毒結(jié)構(gòu)蛋白在實驗動物中的免疫應(yīng)答[J]. 石曉宏,宋干,杭長壽,霍子威,陳健纓.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1995(04)
[9]漢灘病毒核殼蛋白（NP）在桿狀病毒系統(tǒng)的表達及其免疫原性研究[J]. 石曉宏,杭長壽,宋干.  病毒學(xué)報. 1995(02)
[10]流行性出血熱病毒感染鼠的細胞毒T細胞功能中性紅比色分析法[J]. 詹發(fā)先,宋干,杭長壽,李德新,黃永成.  病毒學(xué)報. 1992(03)



本文編號：3552491