發(fā)布時間：2021-12-27 17:52

　　肺炎鏈球菌（S.pneumoniae, S.pn）是一種條件致病菌，自然狀態(tài)下就具有較高的轉(zhuǎn)化率。在肺炎鏈球菌的進(jìn)化、變異和致病過程中環(huán)境因素起著相當(dāng)重要的作用，研究肺炎鏈球菌的致病機(jī)制必須考慮體內(nèi)環(huán)境因素。怎樣在體內(nèi)真實的環(huán)境中去分析細(xì)菌毒力因子的作用是至關(guān)重要的。近幾年作為活細(xì)胞探針的綠色熒光蛋白為我們提供了一種直觀、簡便、準(zhǔn)確的體內(nèi)研究手段。將綠色熒光蛋白與體內(nèi)表達(dá)技術(shù)結(jié)合起來用于研究細(xì)菌毒力因子的表達(dá)，既可以分析細(xì)菌毒力基因的功能又可以篩選出未知的毒力基因。目的：構(gòu)建肺炎鏈球菌自殺性熒光報告質(zhì)粒，將肺炎鏈球菌溶血素基因與熒光報告基因融合，在體內(nèi)環(huán)境中通過熒光的觀察來分析溶血素的表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究肺炎鏈球菌毒力因子在活細(xì)胞內(nèi)的定位和功能分析以及規(guī)模篩選毒力基因打下基礎(chǔ)。方法：采用基因克隆技術(shù)，在肺炎鏈球菌自殺質(zhì)粒pEVP3中插入融合基因ply-gfp。利用自殺質(zhì)粒同源重組的原理，將重組自殺質(zhì)粒整合入肺炎鏈球菌染色體中建立穩(wěn)定的重組菌株。通過對綠色熒光蛋白的直接觀察，在體內(nèi)跟蹤肺炎鏈球菌感染小鼠的過程以及肺炎鏈球菌溶血素的表達(dá)情況。結(jié)<WP=8>果：①成功構(gòu)建了pE... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
一、 符號說明
二、 論文：
    1. 中文摘要
    2. 英文摘要
    3. 正文
        ⑴ 前言
        ⑵ 實驗材料
        ⑶ 實驗方法
        ⑷ 實驗結(jié)果
        ⑸ 討論
        ⑹ 小結(jié)
        ⑺ 實驗圖片
        ⑻ 參考文獻(xiàn)
三、 文獻(xiàn)綜述
四、 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文及參加學(xué)術(shù)活動情況
五、 致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]肺炎鏈球菌粘附機(jī)制的研究現(xiàn)狀[J]. 顏英俊.  國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊). 2000(03)



本文編號：3552441