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microRNA-214-3p在周期性張應(yīng)變誘導(dǎo)內(nèi)皮祖細(xì)胞分化和增殖中的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-12-25 07:16
  目的探討microRNA-214-3p(miR-214-3p)在周期性張應(yīng)變誘導(dǎo)內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells, EPCs)分化和增殖中的作用。方法采用FX-5000T細(xì)胞周期性張應(yīng)變加載裝置對(duì)EPCs施加生理水平的周期性張應(yīng)變(5%幅度、1.25 Hz頻率),加載時(shí)間24 h。應(yīng)用miRNAs芯片篩選周期性張應(yīng)變調(diào)控下差異表達(dá)的miRNAs,并挑選miR-214-3p進(jìn)行深入研究。實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)EPCs內(nèi)平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)相標(biāo)志分子的表達(dá),BrdU結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附ELISA法檢測(cè)EPCs增殖功能。之后,使用miR-214-3p抑制劑抑制miR-214-3p的表達(dá),檢測(cè)EPC內(nèi)VSMC相標(biāo)志分子表達(dá)及EPCs增殖。結(jié)果周期性張應(yīng)變顯著抑制miR-214-3p表達(dá),并抑制EPCs向VSMC相分化,同時(shí)顯著促進(jìn)EPCs增殖。在靜態(tài)條件下,使用miR-214-3p抑制劑干擾miR-214-3p的表達(dá),miR-214-3p水平下降同樣會(huì)抑制EPCs向VSMC相分化,并且誘導(dǎo)EPC... 

【文章來源】:醫(yī)用生物力學(xué). 2019,34(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 EPCs分離及原代培養(yǎng)
    1.2 EPC鑒定
    1.3 周期性張應(yīng)變加載
    1.4 miRNA inhibitor轉(zhuǎn)染
    1.5 實(shí)時(shí)qPCR
        1.5.1 mRNA逆轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)PCR
        1.5.2 miRNA逆轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)PCR
    1.6 BrdU ELISA檢測(cè)細(xì)胞增殖
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 雙熒光標(biāo)記法鑒定EPCs
    2.2 周期性張應(yīng)變對(duì)EPCs功能的影響
    2.3 周期性張應(yīng)變抑制miR-214-3p表達(dá)
    2.4 miR-214-3p調(diào)控EPCs功能
3 討論
4 結(jié)語


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]microRNA-133b在低切應(yīng)力誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞影響血管平滑肌細(xì)胞增殖中的作用[J]. 馬英英,王璐,包晗,韓悅,齊穎新.  醫(yī)用生物力學(xué). 2016(05)



本文編號(hào):3552022

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