目的探討microRNA-214-3p（miR-214-3p）在周期性張應變誘導內皮祖細胞（endothelial progenitor cells, EPCs）分化和增殖中的作用。方法采用FX-5000T細胞周期性張應變加載裝置對EPCs施加生理水平的周期性張應變（5%幅度、1.25 Hz頻率）,加載時間24 h。應用miRNAs芯片篩選周期性張應變調控下差異表達的miRNAs,并挑選miR-214-3p進行深入研究。實時熒光定量PCR方法檢測EPCs內平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）相標志分子的表達,BrdU結合酶聯(lián)免疫吸附ELISA法檢測EPCs增殖功能。之后,使用miR-214-3p抑制劑抑制miR-214-3p的表達,檢測EPC內VSMC相標志分子表達及EPCs增殖。結果周期性張應變顯著抑制miR-214-3p表達,并抑制EPCs向VSMC相分化,同時顯著促進EPCs增殖。在靜態(tài)條件下,使用miR-214-3p抑制劑干擾miR-214-3p的表達,miR-214-3p水平下降同樣會抑制EPCs向VSMC相分化,并且誘導EPC... 

【文章來源】：醫(yī)用生物力學. 2019,34(01)北大核心CSCD

【文章頁數】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 EPCs分離及原代培養(yǎng)
    1.2 EPC鑒定
    1.3 周期性張應變加載
    1.4 miRNA inhibitor轉染
    1.5 實時qPCR
        1.5.1 mRNA逆轉錄及實時PCR
        1.5.2 miRNA逆轉錄及實時PCR
    1.6 BrdU ELISA檢測細胞增殖
    1.7 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 雙熒光標記法鑒定EPCs
    2.2 周期性張應變對EPCs功能的影響
    2.3 周期性張應變抑制miR-214-3p表達
    2.4 miR-214-3p調控EPCs功能
3 討論
4 結語


【參考文獻】：
期刊論文
[1]microRNA-133b在低切應力誘導血管內皮細胞影響血管平滑肌細胞增殖中的作用[J]. 馬英英,王璐,包晗,韓悅,齊穎新.  醫(yī)用生物力學. 2016(05)



本文編號：3552022