本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激對(duì)大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞的不對(duì)稱性影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：通過(guò)建立慢性不可預(yù)見(jiàn)溫和應(yīng)激大鼠模型，考察①慢性應(yīng)激所致大鼠學(xué)習(xí)記憶行為損傷是否在移除應(yīng)激源之后得到自然恢復(fù)；②慢性應(yīng)激下海馬膠質(zhì)細(xì)胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達(dá)是否會(huì)發(fā)生改變；③研究慢性應(yīng)激條件下，膠質(zhì)細(xì)胞中的GFAP和EAAT2蛋白在大鼠海馬三個(gè)亞區(qū)的表達(dá)情況，確定慢性應(yīng)激對(duì)海馬的損傷是否存在靶點(diǎn)。④研究慢性應(yīng)激對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達(dá)在大鼠海馬是否存在不對(duì)稱性影響，并證明以往我們?cè)谘芯恐兴l(fā)現(xiàn)的，慢性應(yīng)激對(duì)海馬的損傷具有右側(cè)偏側(cè)化的特點(diǎn)。⑤研究大鼠海馬中膠質(zhì)細(xì)胞中的GFAP和EAAT2蛋白表達(dá)是否會(huì)隨著應(yīng)激源的去除而得到恢復(fù)，進(jìn)一步探討慢性應(yīng)激造成的海馬損傷的修復(fù)機(jī)制問(wèn)題。 方法：將雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分配到對(duì)照組、應(yīng)激組和恢復(fù)組，建立慢性不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激模型，恢復(fù)組大鼠移除應(yīng)激源后給予5周的自然恢復(fù)時(shí)間。應(yīng)激模型和恢復(fù)模型結(jié)束后進(jìn)行行為測(cè)試，考察大鼠海馬空間學(xué)習(xí)和記憶功能的變化，行為實(shí)驗(yàn)包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)和Y迷宮實(shí)驗(yàn)三部分。行為實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)慢性應(yīng)激組和對(duì)照組大鼠進(jìn)行蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)，，檢測(cè)慢性應(yīng)激后大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能相關(guān)蛋白（GFAP和EAAT2）的表達(dá)水平是否發(fā)生變化。隨后對(duì)三組大鼠海馬組織進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，分別考察在海馬三個(gè)亞區(qū)中慢性應(yīng)激是否對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞具有不對(duì)稱性作用，并進(jìn)一步檢測(cè)移除應(yīng)激35天后這種改變是否得到逆轉(zhuǎn)。 結(jié)果：①慢性應(yīng)激導(dǎo)致海馬空間記憶和行為功能受損，并在應(yīng)激移除后得到一定程度的自然恢復(fù)，表現(xiàn)為水迷宮實(shí)驗(yàn)中恢復(fù)組大鼠在學(xué)習(xí)階段逃離潛伏期顯著地低于應(yīng)激組和對(duì)照組(P0.01)，Y迷宮實(shí)驗(yàn)中應(yīng)激組大鼠并未表現(xiàn)出對(duì)新異臂的偏好，恢復(fù)組與對(duì)照組均表現(xiàn)出新異臂穿梭次數(shù)百分比顯著高于其他兩臂（P0.05）；②大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞中的GFAP和EAAT2兩種蛋白在慢性應(yīng)激中的表達(dá)發(fā)生改變，GFAP表達(dá)顯著上調(diào)（P0.05），EAAT2表達(dá)出現(xiàn)下降（P0.05）；③在慢性應(yīng)激后，海馬不同亞區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白表達(dá)水平在DG區(qū)變化不明顯，在CA1和CA3區(qū)有明顯改變，其中CA3區(qū)最為顯著；④慢性應(yīng)激過(guò)程中，大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白表達(dá)在CA1和CA3區(qū)存在不對(duì)稱性，尤其以右側(cè)改變明顯；⑤移除應(yīng)激源后自然恢復(fù)35天后，慢性應(yīng)激導(dǎo)致的星形膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的變化出現(xiàn)部分的恢復(fù)，但是并未完全達(dá)到正常水平。 結(jié)論：①大鼠對(duì)慢性應(yīng)激導(dǎo)致海馬空間記憶和行為受損具有一定的自我恢復(fù)能力。②星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP和EAAT2兩種蛋白的改變是慢性應(yīng)激導(dǎo)致記憶、行為損傷的重要作用機(jī)制之一。③大鼠海馬的CA1和CA3區(qū)，尤其是CA3區(qū)，可能是慢性應(yīng)激損傷的重要靶點(diǎn)。④慢性應(yīng)激對(duì)海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞的損傷存在右側(cè)偏側(cè)化的特點(diǎn)。⑤慢性應(yīng)激一旦造成海馬結(jié)構(gòu)損傷，其修復(fù)速度比學(xué)習(xí)記憶行為等功能的恢復(fù)要慢，具體機(jī)制則需要進(jìn)一步探討。
【關(guān)鍵詞】：慢行不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激 不對(duì)稱性 星形膠質(zhì)細(xì)胞 海馬 恢復(fù)
【學(xué)位授予單位】：浙江理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-13
• 縮略語(yǔ)13-14
• 引言14-15
• 1 文獻(xiàn)綜述15-25
• 1.1 慢性應(yīng)激15-17
• 1.1.1 應(yīng)激與慢性應(yīng)激15-16
• 1.1.2 抑郁與慢性應(yīng)激16-17
• 1.2 腦不對(duì)稱性17-18
• 1.3 海馬18-20
• 1.3.1 海馬與慢性應(yīng)激18-19
• 1.3.2 海馬的不對(duì)稱性19-20
• 1.4 星形膠質(zhì)細(xì)胞20-23
• 1.4.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞與慢性應(yīng)激21-22
• 1.4.2 膠質(zhì)細(xì)胞的主要相關(guān)蛋白22-23
• 1.5 慢性應(yīng)激的恢復(fù)23-25
• 2 研究設(shè)計(jì)25-29
• 2.1 研究目的25
• 2.2 研究意義25-26
• 2.2.1 理論意義25-26
• 2.2.2 實(shí)踐意義26
• 2.3 研究?jī)?nèi)容26-27
• 2.4 研究假設(shè)27
• 2.5 研究創(chuàng)新27
• 2.6 研究方法27-29
• 3 研究一：慢性應(yīng)激對(duì)大鼠海馬功能的影響29-42
• 3.1 材料和方法29-31
• 3.1.1 動(dòng)物及分組29
• 3.1.2 慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激模型29-30
• 3.1.3 設(shè)備及儀器30
• 3.1.4 藥品及試劑30-31
• 3.2 動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)31-32
• 3.2.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)31
• 3.2.2 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)31-32
• 3.2.3 Y 迷宮實(shí)驗(yàn)32
• 3.3 統(tǒng)計(jì)方法32-33
• 3.4 結(jié)果33-37
• 3.4.1 慢性應(yīng)激對(duì)大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的影響33-34
• 3.4.2 慢性應(yīng)激對(duì)大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)的影響34-36
• 3.4.3 慢性應(yīng)激對(duì)大鼠 Y 迷宮實(shí)驗(yàn)的影響36-37
• 3.5 討論37-41
• 3.5.1 慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激及恢復(fù)模型37-38
• 3.5.2 慢性應(yīng)激及其恢復(fù)與大鼠空間認(rèn)知能力38-41
• 3.6 小結(jié)41-42
• 4 研究二：慢性應(yīng)激導(dǎo)致大鼠海馬不同亞區(qū)中星形膠質(zhì)細(xì)胞中 GFAP 和 EAAT2 蛋白表達(dá)水平的不對(duì)稱性改變42-61
• 4.1 材料和方法42-46
• 4.1.1 動(dòng)物及分組42
• 4.1.2 心臟灌注42
• 4.1.3 蛋白定量42
• 4.1.4 Western blot42-43
• 4.1.5 組織處理43
• 4.1.6 免疫組化43
• 4.1.7 儀器及設(shè)備43-44
• 4.1.8 藥品及試劑44-46
• 4.1.9 圖像采集46
• 4.1.10 統(tǒng)計(jì)方法46
• 4.2 結(jié)果46-57
• 4.2.1 蛋白免疫印跡結(jié)果46-48
• 4.2.2 免疫組化中蛋白表達(dá)的變化48-57
• 4.3 討論57-61
• 4.3.1 慢性應(yīng)激對(duì)膠質(zhì)纖維酸性蛋白 GFAP 表達(dá)的影響57-59
• 4.3.2 興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 EAAT2 表達(dá)的影響59-60
• 4.3.3 小結(jié)60-61
• 5 總討論61-63
• 6 結(jié)論與展望63-65
• 6.1 研究結(jié)論63
• 6.2 展望與不足63-65
• 參考文獻(xiàn)65-77
• 附錄一 Western blot77-78
• 附錄二 組織處理78-79
• 附錄三 免疫組化 EnVision 二步法79-80
• 致謝80

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Expression of fibroblast growth factor-2 and fibroblast growth factor receptor-1 protein in the hippocampus in rats exhibiting chronic stress-induced depression[J];Neural Regeneration Research;2011年13期

  本文關(guān)鍵詞：慢性應(yīng)激對(duì)大鼠海馬膠質(zhì)細(xì)胞的不對(duì)稱性影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：353592