本文關(guān)鍵詞：Wistar大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄模型建立及載脂蛋白J與再狹窄的關(guān)系研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立一個(gè)穩(wěn)定可靠的再狹窄的大鼠動(dòng)物模型,在此基礎(chǔ)上觀察載脂蛋白J(Apolipoprotein J,Apo J)在再狹窄中表達(dá)的變化,探討Apo J與再狹窄的關(guān)系及其可能的作用機(jī)制。方法:Wistar大鼠40只,分為實(shí)驗(yàn)組20只,對(duì)照組20只。經(jīng)鎖骨下靜脈注射肝素后,實(shí)驗(yàn)組用2F Fogarty球囊導(dǎo)管于右側(cè)頸總動(dòng)脈進(jìn)行球囊拉傷,對(duì)照組做假手術(shù)。分別于術(shù)后第1、2、3、4周取靜脈血并處死大鼠,取出右側(cè)頸總動(dòng)脈全段,取其中0.3cm包埋在10%中性福爾馬林中以備病理檢測(cè),余下血管段在液氮中速凍,并轉(zhuǎn)入-80℃冰箱,為生化檢測(cè)備用。HE染色法觀察右側(cè)頸總動(dòng)脈的形態(tài)學(xué)變化,免疫組化的方法檢測(cè)Apo J蛋白在右側(cè)頸總動(dòng)脈中表達(dá)的部位及變化的趨勢(shì),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中Apo J的水平,real-time PCR的方法檢測(cè)右側(cè)頸總動(dòng)脈中Apo J m RNA表達(dá)的水平。結(jié)果:①使用本造模方法實(shí)驗(yàn)組的大鼠存活17只,存活率85%,存活的大鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈均可以觀察到內(nèi)膜的增生,造模成功。平均手術(shù)時(shí)間34.19±6.09分鐘。②HE染色:頸動(dòng)脈損傷后內(nèi)膜出現(xiàn)明顯增厚,增厚的程度隨著時(shí)間逐漸加重�？梢�(jiàn)大量的血管平滑肌(VSMC)向內(nèi)膜遷移,其增殖和遷移的活性較強(qiáng)。在術(shù)后第4周時(shí)管壁側(cè)的VSMC增殖活性開(kāi)始下降。測(cè)量?jī)?nèi)膜/中膜面積比(internal/medial,I/M)來(lái)表示內(nèi)膜增厚的程度,對(duì)照組的I/M接近于0,術(shù)后實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)的I/M均大于對(duì)照組(P0.05),第4周的I/M(2.61±1.12)最大,與第1(0.63±0.04)、2周(1.08±0.29)相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。③免疫組化:實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)均可檢測(cè)到Apo J蛋白,多表達(dá)于中膜及新生內(nèi)膜的VSMC的胞漿中,實(shí)驗(yàn)組3周Apo J蛋白的表達(dá)最強(qiáng),4周出現(xiàn)下降,對(duì)照組的血管全層未能檢測(cè)到Apo J蛋白。④ELISA:對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組血清Apo J在手術(shù)前后均無(wú)顯著差異。⑤real-time PCR:第1周時(shí)實(shí)驗(yàn)組Apo J m RNA水平與對(duì)照組之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.254);第2周時(shí)實(shí)驗(yàn)組Apo J m RNA的表達(dá)顯著高于對(duì)照組(7.58±1.91 vs 0.91±0.17,P=0.006);在第3周時(shí)實(shí)驗(yàn)組Apo J m RNA的表達(dá)達(dá)到高峰(8.49±2.24 vs 0.98±0.21,P=0.007);在第4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組Apo J m RNA開(kāi)始下降,但仍高于對(duì)照組(3.85±0.96 vs 1.05±0.35,P0.001)。結(jié)論:本研究所用的造模方法簡(jiǎn)單實(shí)用,可重復(fù)性強(qiáng),大鼠存活率及成模率高。大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后的內(nèi)膜增生主要由VSMC向內(nèi)膜遷移及增殖導(dǎo)致,新生內(nèi)膜中VSMC增殖和遷移的活性較強(qiáng),但在第4周下降。損傷血管中的Apo J m RNA及蛋白在損傷血管的VSMC中表達(dá)顯著升高,均在第3周最高,第4周下降。提示Apo J與血管損傷及損傷后內(nèi)膜增生密切相關(guān)。血管中高表達(dá)的Apo J主要來(lái)源于損傷組織局部的VSMC合成而非來(lái)源于系統(tǒng)表達(dá),局部合成Apo J的量尚不足以引起全身血清的Apo J水平變化。我們推測(cè)可能作為一種損傷后的代償,通過(guò)抑制VSMC的增殖和遷移的活性對(duì)再狹窄起保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：再狹窄 載脂蛋白J叢生蛋白 冠心病 動(dòng)物模型 血管平滑肌
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.4;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 一、Wistar大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄模型的建立13-28
• 1.1 對(duì)象和方法13-19
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象13
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)所需材料13-15
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法15-19
• 1.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法19
• 1.2 結(jié)果19-23
• 1.2.1 建模存活率及成功率19-20
• 1.2.2 病理檢查結(jié)果20-23
• 1.3 討論23-26
• 1.4 小結(jié)26-28
• 二、載脂蛋白J與Wistar大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷后再狹窄的關(guān)系28-50
• 2.1 對(duì)象和方法28-40
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象28
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)所需材料28-30
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法30-39
• 2.1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法39-40
• 2.2 結(jié)果40-45
• 2.2.1 大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷術(shù)后血管的形態(tài)學(xué)變化40
• 2.2.2 組織中載脂蛋白J表達(dá)情況40-42
• 2.2.3 血清中載脂蛋白J水平的情況42
• 2.2.4 組織中載脂蛋白J mRNA表達(dá)情況42-45
• 2.3 討論45-49
• 2.4 小結(jié)49-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明55-56
• 綜述 載脂蛋白J在心血管領(lǐng)域中研究的進(jìn)展56-76
• 綜述參考文獻(xiàn)68-76
• 致謝76

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本文編號(hào)：353057