本文關(guān)鍵詞：Wistar大鼠頸動脈球囊損傷后再狹窄模型建立及載脂蛋白J與再狹窄的關(guān)系研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:建立一個穩(wěn)定可靠的再狹窄的大鼠動物模型,在此基礎(chǔ)上觀察載脂蛋白J(Apolipoprotein J,Apo J)在再狹窄中表達的變化,探討Apo J與再狹窄的關(guān)系及其可能的作用機制。方法:Wistar大鼠40只,分為實驗組20只,對照組20只。經(jīng)鎖骨下靜脈注射肝素后,實驗組用2F Fogarty球囊導管于右側(cè)頸總動脈進行球囊拉傷,對照組做假手術(shù)。分別于術(shù)后第1、2、3、4周取靜脈血并處死大鼠,取出右側(cè)頸總動脈全段,取其中0.3cm包埋在10%中性福爾馬林中以備病理檢測,余下血管段在液氮中速凍,并轉(zhuǎn)入-80℃冰箱,為生化檢測備用。HE染色法觀察右側(cè)頸總動脈的形態(tài)學變化,免疫組化的方法檢測Apo J蛋白在右側(cè)頸總動脈中表達的部位及變化的趨勢,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清中Apo J的水平,real-time PCR的方法檢測右側(cè)頸總動脈中Apo J m RNA表達的水平。結(jié)果:①使用本造模方法實驗組的大鼠存活17只,存活率85%,存活的大鼠右側(cè)頸總動脈均可以觀察到內(nèi)膜的增生,造模成功。平均手術(shù)時間34.19±6.09分鐘。②HE染色:頸動脈損傷后內(nèi)膜出現(xiàn)明顯增厚,增厚的程度隨著時間逐漸加重�？梢姶罅康难芷交�(VSMC)向內(nèi)膜遷移,其增殖和遷移的活性較強。在術(shù)后第4周時管壁側(cè)的VSMC增殖活性開始下降。測量內(nèi)膜/中膜面積比(internal/medial,I/M)來表示內(nèi)膜增厚的程度,對照組的I/M接近于0,術(shù)后實驗組各時間點的I/M均大于對照組(P0.05),第4周的I/M(2.61±1.12)最大,與第1(0.63±0.04)、2周(1.08±0.29)相比有統(tǒng)計學差異(P0.05)。③免疫組化:實驗組各時間點均可檢測到Apo J蛋白,多表達于中膜及新生內(nèi)膜的VSMC的胞漿中,實驗組3周Apo J蛋白的表達最強,4周出現(xiàn)下降,對照組的血管全層未能檢測到Apo J蛋白。④ELISA:對照組及實驗組血清Apo J在手術(shù)前后均無顯著差異。⑤real-time PCR:第1周時實驗組Apo J m RNA水平與對照組之間沒有統(tǒng)計學差異(P=0.254);第2周時實驗組Apo J m RNA的表達顯著高于對照組(7.58±1.91 vs 0.91±0.17,P=0.006);在第3周時實驗組Apo J m RNA的表達達到高峰(8.49±2.24 vs 0.98±0.21,P=0.007);在第4周時實驗組Apo J m RNA開始下降,但仍高于對照組(3.85±0.96 vs 1.05±0.35,P0.001)。結(jié)論:本研究所用的造模方法簡單實用,可重復性強,大鼠存活率及成模率高。大鼠頸動脈球囊損傷后的內(nèi)膜增生主要由VSMC向內(nèi)膜遷移及增殖導致,新生內(nèi)膜中VSMC增殖和遷移的活性較強,但在第4周下降。損傷血管中的Apo J m RNA及蛋白在損傷血管的VSMC中表達顯著升高,均在第3周最高,第4周下降。提示Apo J與血管損傷及損傷后內(nèi)膜增生密切相關(guān)。血管中高表達的Apo J主要來源于損傷組織局部的VSMC合成而非來源于系統(tǒng)表達,局部合成Apo J的量尚不足以引起全身血清的Apo J水平變化。我們推測可能作為一種損傷后的代償,通過抑制VSMC的增殖和遷移的活性對再狹窄起保護作用。
【關(guān)鍵詞】：再狹窄 載脂蛋白J叢生蛋白 冠心病 動物模型 血管平滑肌
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-13
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-13
• 一、Wistar大鼠頸動脈球囊損傷后再狹窄模型的建立13-28
• 1.1 對象和方法13-19
• 1.1.1 實驗對象13
• 1.1.2 實驗所需材料13-15
• 1.1.3 實驗方法15-19
• 1.1.4 統(tǒng)計學方法19
• 1.2 結(jié)果19-23
• 1.2.1 建模存活率及成功率19-20
• 1.2.2 病理檢查結(jié)果20-23
• 1.3 討論23-26
• 1.4 小結(jié)26-28
• 二、載脂蛋白J與Wistar大鼠頸動脈球囊損傷后再狹窄的關(guān)系28-50
• 2.1 對象和方法28-40
• 2.1.1 實驗對象28
• 2.1.2 實驗所需材料28-30
• 2.1.3 實驗方法30-39
• 2.1.4 統(tǒng)計學方法39-40
• 2.2 結(jié)果40-45
• 2.2.1 大鼠頸動脈球囊損傷術(shù)后血管的形態(tài)學變化40
• 2.2.2 組織中載脂蛋白J表達情況40-42
• 2.2.3 血清中載脂蛋白J水平的情況42
• 2.2.4 組織中載脂蛋白J mRNA表達情況42-45
• 2.3 討論45-49
• 2.4 小結(jié)49-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻51-55
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明55-56
• 綜述 載脂蛋白J在心血管領(lǐng)域中研究的進展56-76
• 綜述參考文獻68-76
• 致謝76

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本文編號：353057