本文關(guān)鍵詞：面神經(jīng)再生過程中軸突非同步生長的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:由于缺乏精確引導(dǎo)、再生軸突及末梢軸突發(fā)芽的特性,面神經(jīng)再生過程中軸突迷亂再生不可避免,神經(jīng)肌肉功能的恢復(fù)程度與多支配終板的減少密切相關(guān),但目前仍不清楚多支配終板形成的原因。我們認(rèn)為,由于面神經(jīng)損傷后近端軸突發(fā)芽分支的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過遠(yuǎn)端殘留的神經(jīng)內(nèi)膜管,再生軸突在向遠(yuǎn)端生長的過程中,進(jìn)入神經(jīng)內(nèi)膜管的軸突分支能夠獲得更多的營養(yǎng)支持、較快到達(dá)靶肌形成新的神經(jīng)肌肉連接,而另一部分還處于失支配狀態(tài)的肌纖維就有可能誘導(dǎo)已到達(dá)靶肌的末梢軸突發(fā)芽,形成多支配終板。因此,探討再生軸突是否存在非同步生長,對于進(jìn)一步認(rèn)識多支配終板形成的機理無疑具有重要意義。方法:本實驗采用基于視頻的大鼠觸須運動分析方法,從功能角度反映靶肌獲得神經(jīng)再支配的時間和程度;在觸須運動功能恢復(fù)的4個時間節(jié)點,采用神經(jīng)元逆行示蹤法記錄、比較到達(dá)靶肌的運動神經(jīng)元數(shù)量,明確再生軸突到達(dá)靶肌的時間是否存在差異,即是否存在再生軸突的非同步生長。1、視頻記錄大鼠觸須運動功能恢復(fù)時間及程度:32只大鼠隨機分成4組,每組8只動物。A組:面神經(jīng)干鉗夾損傷組;B組:面神經(jīng)干切斷吻合組;C組:面神經(jīng)干假手術(shù)組;D組:面神經(jīng)干切斷不修復(fù)組。所有動物右側(cè)為手術(shù)側(cè),左側(cè)為正常對照。采用限制大鼠身體活動、不固定頭顱的體位,視頻記錄術(shù)前及術(shù)后2、4、8、12周兩側(cè)被標(biāo)記觸須運動,用Proanalyst運動分析軟件計算觸須擺動幅度和擺動頻率。2、熒光金逆行示蹤再支配觸須的運動神經(jīng)元:52只大鼠隨機分成四組,A、B組各24只動物,C、D組各2只動物;A組:面神經(jīng)干鉗夾損傷組,B組:面神經(jīng)干切斷吻合組,C組:面神經(jīng)干假手術(shù)組,D組:面神經(jīng)干切斷不修復(fù)組,所有動物右側(cè)為手術(shù)側(cè),左側(cè)為正常對照;A、B組動物按術(shù)后2周、4周、8周、12周隨機分為4個時間小組,每小組6只動物。A、B組動物于術(shù)后1、3、7、11周行雙側(cè)觸須墊熒光金(Fluoro-Gold,FG)逆行示蹤標(biāo)記;C組2只動物于術(shù)后1周行雙側(cè)觸須逆行示蹤標(biāo)記;D組2只動物于術(shù)后11周行雙側(cè)觸須墊FG逆行示蹤標(biāo)記。標(biāo)記1周后,取腦干,以30μm片厚在冰凍切片機上沿腦干長軸水平面作連續(xù)冰凍切片,熒光顯微鏡下計數(shù)被FG標(biāo)記的白色熒光神經(jīng)元。結(jié)果:1、術(shù)前所有動物的觸須擺動行為均顯示雙側(cè)同步和對稱特點,兩側(cè)觸須擺動幅度和頻率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。A組:術(shù)后2周,術(shù)側(cè)觸須平均擺動幅度達(dá)到正常側(cè)的77%(37.8°/49.2°);術(shù)后4周,觸須擺動幅度進(jìn)一步恢復(fù),至12周時觸須擺動幅度恢復(fù)至正常側(cè)的96%(47.3°/49.2°)。B組:術(shù)后4周,術(shù)側(cè)觸須平均擺動幅度達(dá)到正常側(cè)的40%(18.7°/50.0°);此后8周內(nèi),術(shù)側(cè)觸須擺動幅度逐漸恢復(fù)至正常側(cè)的77%(37.8°/49.2°)。術(shù)后4周起,A、B組術(shù)側(cè)觸須擺動頻率與正常側(cè)相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。A組術(shù)側(cè)觸須擺動幅度的恢復(fù)明顯快于、好于B組動物。C組:術(shù)后2周,所有動物都展現(xiàn)了與術(shù)前一致的觸須擺動行為。D組:所有動物術(shù)側(cè)觸須擺動行為完全喪失,觀察期內(nèi)無任何恢復(fù)跡象。2、A、B組在術(shù)后2、4、8、12周時正常側(cè)標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)相比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。A組:術(shù)后2周至12周術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)逐漸增多;術(shù)后2周,術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)為正常側(cè)的19.27%;術(shù)后4周時,術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)為正常側(cè)的86.15%;術(shù)后8周、12周,術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)明顯多于正常側(cè),分別達(dá)正常側(cè)的126.5%和128.49%。B組:術(shù)后2周時術(shù)側(cè)無明顯可見的標(biāo)記細(xì)胞,術(shù)后4周至12周術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞逐漸增多;術(shù)后4周,術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)為正常側(cè)的58.46%;術(shù)后8周、12周,術(shù)側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)明顯多于正常側(cè),分別達(dá)正常側(cè)的116.27%和131.91%。C組:術(shù)后2周,2只動物兩側(cè)標(biāo)記細(xì)胞數(shù)無明顯差異。D組:術(shù)后12周,2只動物術(shù)側(cè)標(biāo)記神經(jīng)元數(shù)為0。結(jié)論:1、我們將普通視頻技術(shù)與大鼠身體限制措施、合適的運動分析軟件相結(jié)合,可以滿足面神經(jīng)損傷或缺損修復(fù)后功能恢復(fù)評價的需要,為進(jìn)一步確定逆行示蹤再支配神經(jīng)元的時間點提供了客觀、量化的功能恢復(fù)依據(jù)。2、我們通過FG逆行示蹤支配觸須運動神經(jīng)元數(shù)量的實驗,初步明確了面神經(jīng)干損傷后再生軸突存在非同步生長現(xiàn)象,為進(jìn)一步研究再生軸突非同步生長與靶肌多支配終板形成之間的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：面神經(jīng) 再生 軸突 觸須 視頻 逆行示蹤
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-14
• 第一部分 視頻記錄大鼠觸須運動功能恢復(fù)時間及程度14-24
• 一、實驗材料15
• 二、實驗方法15-19
• 三、實驗結(jié)果19-22
• 四、討論22-23
• 五、結(jié)論23-24
• 第二部分 熒光金逆行示蹤再支配觸須的運動神經(jīng)元24-39
• 一、實驗材料25-26
• 二、實驗方法26-33
• 三、實驗結(jié)果33-35
• 四、討論35-38
• 五、結(jié)論38-39
• 全文小結(jié)39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 綜述 面神經(jīng)迷亂再生的研究進(jìn)展44-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作情況55-56
• 致謝56

【相似文獻(xiàn)】

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1 王傳松;大、小鼠面神經(jīng)核的形態(tài)和發(fā)育[J];動物學(xué)雜志;1989年03期

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2 朱，

本文編號：345270