目的構(gòu)建血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2（ACE2）的復(fù)制缺陷重組腺病毒Ad-ACE2,并觀察其對載脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠動脈硬化黏附分子的影響及意義。方法采用RT-PCR反應(yīng),從小鼠腎臟組織中擴增出小鼠ACE2基因全長的cDNA序列,克隆到pMD18-T載體,再亞克隆到pDC316載體,構(gòu)建穿梭質(zhì)粒（pDC316-ACE2）。穿梭質(zhì)粒與腺病毒骨架質(zhì)粒進(jìn)行同源重組,形成重組腺病毒質(zhì)粒,重組腺病毒質(zhì)粒在293細(xì)胞內(nèi)包裝成為復(fù)制缺陷重組腺病毒Ad-ACE2。采用高脂飼養(yǎng)建立動脈粥樣硬化模型后,將16只ApoE-/-小鼠隨機分為ACE2基因治療組和ACE2基因?qū)φ战M,每組8只。通過尾靜脈注射Ad-ACE2和Ad-EGFP分別干預(yù),采用油紅O染色,免疫組化及Western blotting觀察ACE2治療后斑塊的脂質(zhì)含量、血管細(xì)胞黏附分子（VCAM-1）及E-選擇素的變化。結(jié)果 RT-PCR反應(yīng)、酶切及測序結(jié)果證實,Ad-ACE2構(gòu)建成功;ACE2基因治療組動脈硬化斑塊內(nèi)脂質(zhì)含量和黏附分子的表達(dá)低于ACE2基因?qū)φ战M。結(jié)論 Ad-ACE2構(gòu)建成功;ACE2基因過表達(dá)可降低動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的... 

【文章來源】：山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2014,52(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
2 結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]阿托伐他汀對Krüppel樣轉(zhuǎn)錄因子2在載脂蛋白E基因敲除小鼠中表達(dá)的影響[J]. 周曉斌,楊麗霞,郭瑞威,齊峰,石燕昆,衡旭華,梁星.  中華高血壓雜志. 2012(08)



本文編號：3418937