CVA10候選疫苗病毒株的分離、鑒定及其致病性和免疫保護(hù)性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 21:49
目的分離、篩選柯薩奇病毒A組10型(Coxsackievirus A10,CVA10)病毒候選疫苗株,并對(duì)其免疫原性及免疫保護(hù)性進(jìn)行評(píng)價(jià),為CVA10疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。方法本研究從北京市兒童醫(yī)院、軍事醫(yī)學(xué)研究院、北京市疾控中心共收集80個(gè)手足口。╤and foot and mouth disease,HFMD)標(biāo)本,通過細(xì)胞培養(yǎng)法、RT-PCR的方法分離、鑒定CVA10病毒株。對(duì)病毒進(jìn)行嗜斑純化,各純化病毒株與Al(OH)3(0.5 g/ml)佐劑混合后制備原疫苗,免疫Balb/c小鼠,收集血清。應(yīng)用交叉中和實(shí)驗(yàn)及抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)篩選候選CVA10疫苗株。篩選后T9疫苗株免疫ICR乳鼠,觀察ICR乳鼠的致病情況。結(jié)果共分離出14株CVA10病毒株。交叉中和實(shí)驗(yàn)篩選得到4株候選疫苗株。最后陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)確定T9為候選疫苗株。Al(OH)3+CVA10滅活抗原在Balb/c小鼠體內(nèi)能誘生高滴度的特異性抗體,該抗體對(duì)Balb/c小鼠有保護(hù)作用。T9病毒免疫ICR乳鼠后,對(duì)乳鼠完全致死。結(jié)論篩選1株CVA10病毒候選疫苗株,CVA10候選疫苗對(duì)ICR乳...
【文章來(lái)源】:免疫學(xué)雜志. 2019,35(06)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
1.3 病毒的分離
1.4 病毒RT-PCR基因鑒定
1.5 病毒的TCID50滴定
1.6 病毒的嗜斑純化
1.7 交叉中和實(shí)驗(yàn)
1.8 抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)
1.9 動(dòng)物模型建立
1.9.1 CAV10篩選毒株P(guān)FU的測(cè)定
1.9.2 病毒CVA10篩選毒株LD50的測(cè)定
1.9.3 病理檢測(cè)
2 結(jié)果
2.1 CVA10病毒株分離鑒定
2.2 CVA10病毒滴度測(cè)定
2.3 交叉中和實(shí)驗(yàn)
2.4 抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)
2.5 分離毒株T9的LD50測(cè)定
2.6 CVA10感染乳鼠病理結(jié)果
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]加巴噴丁體內(nèi)外抗RSV感染的作用[J]. 時(shí)艷婷,谷宏婧,楊曉嵐,段躍強(qiáng),趙忠鵬,周婭,楊鵬輝,王希良. 免疫學(xué)雜志. 2018(05)
[2]EV71相關(guān)疫苗研究進(jìn)展[J]. 李甜,鄧?yán)? 北京醫(yī)學(xué). 2015(10)
[3]人腸道病毒71型和科薩奇病毒A組16型所致手足口病的主要臨床表現(xiàn)和預(yù)后[J]. 謝國(guó)錦,謝芳藝,張國(guó)鋒,周峰,姚堃. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(10)
[4]柯薩奇病毒A組16型的3C蛋白抑制RIG-Ⅰ介導(dǎo)的IFN-β的誘導(dǎo)[J]. 楊彬,王鳳龍. 免疫學(xué)雜志. 2011(09)
[5]五株EV71病毒毒力、免疫原性與基因組比較分析[J]. 劉鑫,段長(zhǎng)松,李仲,王校偉,趙忠鵬,王希良. 免疫學(xué)雜志. 2011(06)
[6]妊娠不同時(shí)期柯薩奇病毒隱性感染對(duì)胎兒及新生兒影響的研究[J]. 趙丹霓. 河北醫(yī)藥. 2009(06)
本文編號(hào):3414538
【文章來(lái)源】:免疫學(xué)雜志. 2019,35(06)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 主要儀器
1.3 病毒的分離
1.4 病毒RT-PCR基因鑒定
1.5 病毒的TCID50滴定
1.6 病毒的嗜斑純化
1.7 交叉中和實(shí)驗(yàn)
1.8 抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)
1.9 動(dòng)物模型建立
1.9.1 CAV10篩選毒株P(guān)FU的測(cè)定
1.9.2 病毒CVA10篩選毒株LD50的測(cè)定
1.9.3 病理檢測(cè)
2 結(jié)果
2.1 CVA10病毒株分離鑒定
2.2 CVA10病毒滴度測(cè)定
2.3 交叉中和實(shí)驗(yàn)
2.4 抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率實(shí)驗(yàn)
2.5 分離毒株T9的LD50測(cè)定
2.6 CVA10感染乳鼠病理結(jié)果
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]加巴噴丁體內(nèi)外抗RSV感染的作用[J]. 時(shí)艷婷,谷宏婧,楊曉嵐,段躍強(qiáng),趙忠鵬,周婭,楊鵬輝,王希良. 免疫學(xué)雜志. 2018(05)
[2]EV71相關(guān)疫苗研究進(jìn)展[J]. 李甜,鄧?yán)? 北京醫(yī)學(xué). 2015(10)
[3]人腸道病毒71型和科薩奇病毒A組16型所致手足口病的主要臨床表現(xiàn)和預(yù)后[J]. 謝國(guó)錦,謝芳藝,張國(guó)鋒,周峰,姚堃. 南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(10)
[4]柯薩奇病毒A組16型的3C蛋白抑制RIG-Ⅰ介導(dǎo)的IFN-β的誘導(dǎo)[J]. 楊彬,王鳳龍. 免疫學(xué)雜志. 2011(09)
[5]五株EV71病毒毒力、免疫原性與基因組比較分析[J]. 劉鑫,段長(zhǎng)松,李仲,王校偉,趙忠鵬,王希良. 免疫學(xué)雜志. 2011(06)
[6]妊娠不同時(shí)期柯薩奇病毒隱性感染對(duì)胎兒及新生兒影響的研究[J]. 趙丹霓. 河北醫(yī)藥. 2009(06)
本文編號(hào):3414538
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