結核病（tuberculosis, TB）是由結核分枝桿菌導致的一種嚴重感染性疾病。近年來隨著耐藥結核菌不斷出現(xiàn),發(fā)展新型抗結核藥物迫在眉睫。本研究利用與結核分枝桿菌高度類似的海分枝桿菌為模式生物,建立了海分枝桿菌-斑馬魚幼魚感染模型和細菌菌數(shù)定量PCR （quantitative PCR, qPCR）分析方法。研究表明,卵黃囊注射海分枝桿菌是一種高效、便捷的感染斑馬魚胚胎方式。通過測定感染的斑馬魚存活率、斑馬魚體內細菌數(shù)目和ZiehlNeelsen抗酸性染色指標,對抗結核藥物異煙肼和利福平的藥效、藥物之間的協(xié)同作用等多個參數(shù)進行了分析和比較,結果表明3種評價方法具有較好的一致性。本研究證實了海分枝桿菌-斑馬魚感染模型結合細菌菌數(shù)qPCR分析方法是一種簡單、高效的抗結核藥物體內篩選和評價系統(tǒng)。本研究依據(jù)中國醫(yī)學科學院醫(yī)藥生物技術研究所《實驗動物管理條例》中相關倫理規(guī)定,開展動物實驗。 

【文章來源】：藥學學報. 2019,54(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    菌株
    實驗動物
    顯微注射
    斑馬魚切片染色
    qPCR測定海分枝桿菌DNA
    細菌數(shù)的計算
    半數(shù)抑制濃度 (half maximal inhibitory concen‐tration, IC50) 的計算
    統(tǒng)計學方法
結果
    1 海分枝桿菌927株-斑馬魚幼魚感染模型的建立
    2 應用qPCR的方法在幼魚中評價藥物的療效
    3 應用qPCR計數(shù)法計算抗結核藥物異煙肼和利福平的IC50
    4 利福平與異煙肼的協(xié)同作用
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]以莽草酸激酶為靶點的新型抗結核先導化合物的發(fā)現(xiàn)[J]. 王霞,朱寧嶼,姜威,司書毅.  藥學學報. 2018(06)
[2]分枝桿菌膜蛋白3抑制劑的研究進展[J]. 楊旭,張翔.  藥學學報. 2017(09)



本文編號：3403884