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IL-2Rα基因體外轉(zhuǎn)錄體系的構(gòu)建及調(diào)控機(jī)制的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-25 21:11
  淋巴細(xì)胞活化和定向分化過程一直是免疫學(xué)研究的中心問題之一。靜止淋巴細(xì)胞在受到抗原刺激后,首先發(fā)生一系列生化改變。經(jīng)歷活化和定向分化過程,才能成為能發(fā)揮生物學(xué)功能的效應(yīng)細(xì)胞。從分子生物學(xué)的角度來看,淋巴細(xì)胞的活化和定向分化,實(shí)際上是淋巴細(xì)胞中一組基因被誘導(dǎo)表達(dá)的過程。外界的信號(hào),通過細(xì)胞表面的信號(hào)識(shí)別分子,傳導(dǎo)到細(xì)胞質(zhì)中,最后傳導(dǎo)到細(xì)胞核內(nèi),調(diào)節(jié)某些早期基因的表達(dá),并可導(dǎo)致進(jìn)一步的級(jí)聯(lián)反應(yīng),即一些基因表達(dá)的產(chǎn)物會(huì)調(diào)控另一些基因的表達(dá);同時(shí)某些被調(diào)控基因的產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外(如淋巴因子),并調(diào)控淋巴細(xì)胞或其它細(xì)胞的功能,使淋巴細(xì)胞的效應(yīng)作用得以實(shí)現(xiàn)。 在淋巴細(xì)胞,尤其是T淋巴細(xì)胞的活化過程中,IL-2分泌(僅限于T?)和IL-2R表達(dá)是極其重要的兩個(gè)生化事件,IL-2和IL-2R的相互作用是細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期的前提條件,IL-2和IL-2R表達(dá)的障礙將會(huì)使細(xì)胞停滯在G1期,不產(chǎn)生增殖反應(yīng)。由此可見,探討IL-2R表達(dá)的調(diào)控機(jī)制,對于從更精細(xì)的角度認(rèn)識(shí)T細(xì)胞活化,具有十分重要的意義。 IL-2Rα是IL-2R三鏈結(jié)構(gòu)中可誘導(dǎo)性最強(qiáng)的一條鏈。它的表達(dá)在很大程度... 

【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】:105 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

IL-2Rα基因體外轉(zhuǎn)錄體系的構(gòu)建及調(diào)控機(jī)制的研究


pHZ482的篩選

重組體,體外轉(zhuǎn)錄


234圖8.重組體的鑒定8.CharaeterlzationO乙月寸NA/H1ndlll482/EeoRILaneLaneofR:pH:pH粒的構(gòu)建:ZRa體外轉(zhuǎn)錄體系對基因度不同于pHZ482的另兩個(gè)

切條件,瓊脂,低熔點(diǎn),濃度


重組后形成的pHZ267和pHZ350經(jīng)Eeo與預(yù)期相符。DNA醉切連接和轉(zhuǎn)化的方法學(xué)探討:影晌:點(diǎn)瓊脂據(jù)凝膠內(nèi)的1.4KbILZRa轉(zhuǎn)錄卜:l(約0.6以g)構(gòu)建20“l(fā)的誼切體行酸切。結(jié)果如圖12。由圖可見,當(dāng)醉蕊t為2,5,10,20u時(shí),1.4KbDHAO.IKb的三個(gè)小片段‘其幽‘幾么心‘菌片)。


本文編號(hào):3362861

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