目的 應(yīng)用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）和隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）技術(shù)獲取安徽省三種常見(jiàn)蜚蠊的可溶性蛋白質(zhì)區(qū)帶和DNA指紋圖譜，對(duì)三種常見(jiàn)蜚蠊的可溶性蛋白質(zhì)和基因組DNA多態(tài)性進(jìn)行分析研究，為蜚蠊分類提供科學(xué)依據(jù)。方法 采集安徽省三種常見(jiàn)蜚蠊黑胸大蠊、美洲大蠊、德國(guó)小蠊成蟲(chóng)標(biāo)本，進(jìn)行形態(tài)學(xué)的分析鑒定。首先應(yīng)用凍融勻漿法制備這三種蜚蠊的可溶性蛋白質(zhì)勻漿液，進(jìn)行十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE），獲取三種常見(jiàn)蜚蠊的可溶性蛋白質(zhì)區(qū)帶，用考馬斯亮藍(lán)G-250染色后，觀察和計(jì)算出各蜚蠊主要蛋白質(zhì)區(qū)帶的分子量。然后，提取三種蜚蠊的基因組DNA，進(jìn)行鑒定及定量分析。確定隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）反應(yīng)總體積、反應(yīng)條件。選取5條不同的隨機(jī)排列堿基順序的多聚核苷酸單鏈為引物，進(jìn)行RAPD-PCR擴(kuò)增反應(yīng)。將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，獲得這三種蜚蠊的DNA圖譜，計(jì)算出三種蜚蠊種間的遺傳距離。最后對(duì)這三種蜚蠊可溶性蛋白質(zhì)區(qū)帶和基因組DNA多態(tài)性分析和研究。結(jié)果 用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS—PAGE）進(jìn)行研究顯示：黑胸大蠊（P.f.）... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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安徽省三種常見(jiàn)蜚蠊可溶性蛋白質(zhì)和基因組DNA的分析
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
            2.2.1 SDS-PAGE方法
                2.2.1.1 取蜚蠊成蟲(chóng)的胸段制備蛋白質(zhì)勻漿
                2.2.1.2 SDS-PAGE電泳
                2.2.1.3 數(shù)據(jù)處理
            2.2.2 RAPD方法
                2.2.2.1 取蜚蠊成蟲(chóng)的胸段提取基因組DNA
                2.2.2.2 DNA的純度及定量分析
                2.2.2.3 基因組DNA擴(kuò)增
                2.2.2.4 基因組DNA擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)
                2.2.2.5 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié) 果
        3.1 三種蜚蠊可溶性蛋白質(zhì)SDS-PAGE結(jié)果
        3.2 三種蜚蠊基因組DNA隨機(jī)擴(kuò)增（RAPD）結(jié)果
    4 討 論
        4.1 關(guān)于SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論
        4.2 關(guān)于RAPD實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論
        4.3 關(guān)于實(shí)驗(yàn)條件的分析討論
            4.3.1 蜚蠊的取材
                4.3.1.1 不同蟲(chóng)期標(biāo)本的選擇
                4.3.1.2 不同保存方法的影響
            4.3.2 SDS-PAGE和RAPD實(shí)驗(yàn)條件討論
                4.3.2.1 關(guān)于RAPD實(shí)驗(yàn)條件討論
                4.3.2.2 關(guān)于SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)條件討論
        4.4 關(guān)于SDS-PAGE和RAPD用于昆蟲(chóng)分類的研究
        4.5 本研究尚存在的不足和進(jìn)一步展望
    5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附 錄
致 謝
綜 述



本文編號(hào)：3351031