目的:探討自噬下游抑制劑巴弗洛霉素A1（bafilomycin A1,Baf A1）對(duì)小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7極化的影響。方法:用Baf A1作用于小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)M1/M2極化相關(guān)細(xì)胞因子的含量;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面M1/M2極化相關(guān)標(biāo)志物;免疫熒光觀察自噬小體形成情況;Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白水平變化。結(jié)果:Baf A1處理后,RAW264.7細(xì)胞分泌的促炎性細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α（TNF-α）顯著增高（P<0.01）,而抑炎性細(xì)胞因子IL-10和IL-13的含量變化無顯著差異。Baf A1處理的細(xì)胞表面標(biāo)志物中CD197和HLA-DR（M1標(biāo)志物）雙陽性率與對(duì)照組相比顯著升高（P<0.05）,說明Baf A1可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1方向極化。免疫熒光結(jié)果顯示,Baf A1處理后細(xì)胞自噬小體顯著增多（P<0.05）。Western blot結(jié)果顯示Baf A1處理后,自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ表達(dá)顯著升高（P<0.05）,而P62蛋白表達(dá)無顯著差異。在自噬激活劑雷帕霉素處理組中,自噬體同樣顯著增多（P... 

【文章來源】：中國(guó)病理生理雜志. 2019,35(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 細(xì)胞與材料
        1.1 細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)分組
        1.2 材料與試劑
    2 觀察指標(biāo)及方法
        2.1 ELISA測(cè)定炎癥相關(guān)因子的含量
        2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面相關(guān)抗原表達(dá)
        2.3 免疫熒光化學(xué)法檢測(cè)LC3-Ⅱ的表達(dá)
        2.4 Western blot檢測(cè)LC3-Ⅱ和P62表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 各處理組細(xì)胞相關(guān)炎癥因子的表達(dá)
    2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各處理組細(xì)胞表面極化相關(guān)標(biāo)志物
    3 免疫熒光化學(xué)法檢測(cè)各處理組細(xì)胞LC3-II表達(dá)
    4 Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的變化
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]厄貝沙坦通過誘導(dǎo)自噬減輕db/db小鼠肝臟脂肪變[J]. 鐘娟,青姚,吳曙粵,龔?fù)?龍海波.  中國(guó)病理生理雜志. 2018(03)
[2]糖尿病潰瘍中Wnt/β-catenin信號(hào)通路表達(dá)的變化[J]. 趙亞男,劉明,張玥,王彬,張玉冬,蘇海文,任曉蘭,郝清智.  中國(guó)病理生理雜志. 2015(11)



本文編號(hào)：3304287