發(fā)布時間：2021-07-27 01:36

　　目的:構(gòu)建輪狀病毒重組NSP4_86-175表達蛋白,對其致瀉能力進行初步評價。方法:從輪狀病毒SA11病毒株中提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,利用PCR技術(shù)擴增目的基因并制備E.coli DH5α感受態(tài)細胞,酶切pMD19T-NSP4,pMD19T-NSP4_86-175質(zhì)粒和pET28a（+）質(zhì)粒構(gòu)建輪狀病毒重組NSP4_86-175表達質(zhì)粒,誘導其表達NSP4_86-175蛋白,經(jīng)Glutathione SepharoseTM 4B純化并鑒定。取新生6天乳鼠40只,隨機分為四組,每組各10只。第1組腹腔注射0.5 nmol重組蛋白,第2組腹腔注射1.0 nmol重組蛋白,第3組腹腔注射1.5 nmol重組蛋白,第4組腹腔注射生理鹽水作為對照組。觀察其對小鼠的腹瀉和生長發(fā)育的影響。結(jié)果:第1組的腹瀉率為20%,第2組的腹瀉率為30%,第3組的腹瀉率為70%,第4組的腹瀉率為10%,四組間比較,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,其中第3組的腹瀉率最高。在體重增長情況方面,在第96小時時,第1組平均增加... 

【文章來源】：吉林醫(yī)學. 2019,40(06)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試劑及儀器:
    1.2 輪狀病毒重組NSP486-175表達質(zhì)粒的構(gòu)建:
    1.3 輪狀病毒重組NSP486-175的誘導表達、純化及鑒定:
    1.4 輪狀病毒重組NSP486-175感染小鼠的模型建立:
    1.5 觀察方法:
    1.6 統(tǒng)計學處理:
2 結(jié)果
    2.1 輪狀病毒重組NSP486-175表達質(zhì)粒的構(gòu)建:
    2.2 輪狀病毒重組NSP486-175蛋白的誘導表達、純化及鑒定:
    2.3 輪狀病毒重組NSP486-175對小鼠的致瀉能力:
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]輪狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白的研究進展[J]. 楊梅,陳蘭舉.  實用兒科臨床雜志. 2010(19)
[2]兩株Wa株人源輪狀病毒NSP4蛋白的表達及其致ICR小鼠腹瀉的毒力比較[J]. 龐偉,黃永坤,孟明耀,王萍,劉建生,徐冬蕾,戚勤,侯宗柳.  醫(yī)學分子生物學雜志. 2005(02)
[3]人輪狀病毒NSP4蛋白的表達及其致小鼠腹瀉作用的初步研究[J]. 王大燕,王健偉,魏強,屈建國,于修平,洪濤.  中國病毒學. 2003(03)



本文編號：3304796