目的:構(gòu)建輪狀病毒重組NSP4_86-175表達(dá)蛋白,對(duì)其致瀉能力進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。方法:從輪狀病毒SA11病毒株中提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因并制備E.coli DH5α感受態(tài)細(xì)胞,酶切pMD19T-NSP4,pMD19T-NSP4_86-175質(zhì)粒和pET28a（+）質(zhì)粒構(gòu)建輪狀病毒重組NSP4_86-175表達(dá)質(zhì)粒,誘導(dǎo)其表達(dá)NSP4_86-175蛋白,經(jīng)Glutathione SepharoseTM 4B純化并鑒定。取新生6天乳鼠40只,隨機(jī)分為四組,每組各10只。第1組腹腔注射0.5 nmol重組蛋白,第2組腹腔注射1.0 nmol重組蛋白,第3組腹腔注射1.5 nmol重組蛋白,第4組腹腔注射生理鹽水作為對(duì)照組。觀察其對(duì)小鼠的腹瀉和生長(zhǎng)發(fā)育的影響。結(jié)果:第1組的腹瀉率為20%,第2組的腹瀉率為30%,第3組的腹瀉率為70%,第4組的腹瀉率為10%,四組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,其中第3組的腹瀉率最高。在體重增長(zhǎng)情況方面,在第96小時(shí)時(shí),第1組平均增加... 

【文章來源】：吉林醫(yī)學(xué). 2019,40(06)

【文章頁數(shù)】：3 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試劑及儀器:
    1.2 輪狀病毒重組NSP486-175表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建:
    1.3 輪狀病毒重組NSP486-175的誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定:
    1.4 輪狀病毒重組NSP486-175感染小鼠的模型建立:
    1.5 觀察方法:
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:
2 結(jié)果
    2.1 輪狀病毒重組NSP486-175表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建:
    2.2 輪狀病毒重組NSP486-175蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)、純化及鑒定:
    2.3 輪狀病毒重組NSP486-175對(duì)小鼠的致瀉能力:
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]輪狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白的研究進(jìn)展[J]. 楊梅,陳蘭舉.  實(shí)用兒科臨床雜志. 2010(19)
[2]兩株Wa株人源輪狀病毒NSP4蛋白的表達(dá)及其致ICR小鼠腹瀉的毒力比較[J]. 龐偉,黃永坤,孟明耀,王萍,劉建生,徐冬蕾,戚勤,侯宗柳.  醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2005(02)
[3]人輪狀病毒NSP4蛋白的表達(dá)及其致小鼠腹瀉作用的初步研究[J]. 王大燕,王健偉,魏強(qiáng),屈建國(guó),于修平,洪濤.  中國(guó)病毒學(xué). 2003(03)



本文編號(hào)：3304796