Oncomodulin在小鼠腦發(fā)育過程中的表達及其性別差異的研究
本文關(guān)鍵詞:Oncomodulin在小鼠腦發(fā)育過程中的表達及其性別差異的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究背景腦的發(fā)育和分化從早期乃至生命周期結(jié)束,是一個漫長持久的過程,這個過程受基因、分子和環(huán)境等多種因素的影響。腦的結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜,表現(xiàn)出一定的性別差異。盡管腦研究已取得了一定的突破,但它還存在無數(shù)的奧秘需要人們?nèi)ヌ剿?為許多腦發(fā)育畸形以及神經(jīng)退行性疾病找到理論依據(jù)。目前,腦的發(fā)育研究已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域中的一個研究重點。鈣結(jié)合蛋白(Calcium binding protein,Ca BP)是在生物信號中鈣離子的重要載體。研究表明其家族中的很多成員在腦內(nèi)有表達并聚集在神經(jīng)元內(nèi),它在維持神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)和功能、神經(jīng)遞質(zhì)的釋放及神經(jīng)元的發(fā)育等方面發(fā)揮著極其重要的作用。癌鈣調(diào)蛋白(Oncomodulin,Ocm)是鈣結(jié)合蛋白家族成員之一。目前,研究者對Ocm在神經(jīng)系統(tǒng)中的表達和作用認識的還比較少,其發(fā)現(xiàn)主要在內(nèi)耳和視神經(jīng)方面。也有研究者檢測了小鼠間腦Ocm的m RNA水平,發(fā)現(xiàn)Ocm在小鼠間腦部位有低表達,但Ocm在腦內(nèi)其它部位是否有表達還不是很清楚,它在腦發(fā)育的不同發(fā)育時期以及在不同性別腦內(nèi)的表達是否存在差異還未見相關(guān)報道。本項研究我們首先觀察了Ocm在成年小鼠腦內(nèi)的表達和分布情況,然后再進一步探索它在小鼠出生后不同發(fā)育時期主要腦區(qū)的表達變化,最后我們還在小鼠腦內(nèi)檢測了Ocm表達的性別差異。本項研究為以后進一步深入探索Ocm在腦內(nèi)的功能奠定形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。主要方法使用硫酸鎳銨增強顯色的免疫組織化學(xué)方法檢測Ocm在成年C57BL/6小鼠腦內(nèi)的分布以及在性別腦之間表達的差異。運用RT-qPCR方法檢測小鼠腦發(fā)育不同發(fā)育時期(P3d、P7d、P21d、P60d),Ocm基因的表達模式。主要結(jié)果1.Ocm陽性細胞染色結(jié)果為藍黑色,陽性產(chǎn)物主要位于細胞胞漿,并且主要表達在神經(jīng)元內(nèi)。2.Ocm免疫陽性產(chǎn)物在腦內(nèi)廣泛表達,但在各腦區(qū)分布不是很均勻,如在大腦皮層、海馬、丘腦等均可見強陽性表達,而在黑質(zhì)和紋狀體部位表達很少。3.小鼠出生后不同發(fā)育時期(P3、P7、P21、P60),Ocm在嗅球、大腦皮層、中腦和小腦部位均有表達,并且它在這些不同部位表達的變化趨勢是不一致的。4.Ocm免疫陽性產(chǎn)物在雌性小鼠和雄性小鼠腦內(nèi)表達部位比較相似,但少數(shù)核團在表達程度上也存在性別差異。主要結(jié)論1.Ocm在正常C57/BL6小鼠的腦組織中廣泛表達,提示Ocm可能參與腦內(nèi)的一些生理功能。2.在出生后不同發(fā)育時期小鼠腦內(nèi)均能檢測到Ocm表達,提示Ocm可能參與了腦的發(fā)育過程。3.Ocm陽性產(chǎn)物在雌性小鼠和雄性小鼠的同一核團表現(xiàn)出某些性別差異,提示Ocm可能受激素的影響,在腦內(nèi)發(fā)揮的調(diào)節(jié)作用是不一樣的?傊,本研究利用PCR和免疫組化技術(shù)比較全面的研究了Ocm在小鼠腦內(nèi)的表達模式及其在發(fā)育過程中的動態(tài)變化,為探索Ocm在腦的功能提供了重要的實驗依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】:癌鈣調(diào)蛋白 腦 發(fā)育 小鼠 雄性 雌性
【學(xué)位授予單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R338
【目錄】:
- 英文縮寫一覽表4-6
- 英文摘要6-8
- 中文摘要8-10
- 第一章 前言10-13
- 第二章 Oncomodulin在成年小鼠腦內(nèi)的表達與分布13-23
- 2.1 材料和方法13-17
- 2.2 實驗結(jié)果17-21
- 2.3 討論21-22
- 2.4 小結(jié)22-23
- 第三章 Oncomodulin在生后不同發(fā)育時期小鼠腦內(nèi)表達的差異23-30
- 3.1 材料和方法23-26
- 3.2 實驗結(jié)果26-29
- 3.3 討論29
- 3.4 小結(jié)29-30
- 第四章 Oncomodulin在成年小鼠腦內(nèi)表達的性別差異30-37
- 4.1 材料和方法30-33
- 4.2 實驗結(jié)果33-36
- 4.3 討論36
- 4.4 小結(jié)36-37
- 全文總結(jié)37-38
- 參考文獻38-42
- 文獻綜述 神經(jīng)系統(tǒng)中Oncomodulin表達分布與功能研究進展42-49
- 參考文獻46-49
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表和撰寫的文章49-50
- 攻讀碩士學(xué)位期間參加的課題50-51
- 致謝51
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