本文關(guān)鍵詞：間充質(zhì)干細(xì)胞的條件培養(yǎng)上清影響PC12細(xì)胞帕金森病模型增殖的作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)可以通過分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞、調(diào)節(jié)免疫和誘導(dǎo)原位神經(jīng)生長因子的分化等機(jī)制發(fā)揮神經(jīng)修復(fù)及促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)生長的作用。粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF)可以促進(jìn)神經(jīng)分化和神經(jīng)元增殖、抵抗神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí)的炎癥,具有明顯的對神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用,可以促進(jìn)神經(jīng)損傷時(shí)結(jié)構(gòu)的重建與功能的修復(fù)。帕金森病(Parkinson's disease, PD)是一種以中腦黑質(zhì)-紋狀體通路內(nèi)的多巴胺能神經(jīng)元進(jìn)行性退變?yōu)橹饕±硖卣鞯牟∽�。我們運(yùn)用MSCs的條件培養(yǎng)上清刺激PC12細(xì)胞的帕金森病細(xì)胞模型的增殖,以此驗(yàn)證MSCs的促神經(jīng)生長作用,并且推測其中含有G-CSF的條件培養(yǎng)上清促進(jìn)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞增值的作用更強(qiáng)。目的分離、培養(yǎng)以及鑒定間充質(zhì)干細(xì)胞,探討其條件培養(yǎng)上清對PC12細(xì)胞及該細(xì)胞帕金森病模型增殖的影響。方法我們采用組織塊貼壁法從臍帶組織中分離出長梭形細(xì)胞,后用流式細(xì)胞術(shù)鑒定其免疫表型,用染色法鑒定其成脂與成骨分化能力；用Mpp+處理PC12細(xì)胞的方法建立PD細(xì)胞模型；之后用刀豆素A (conA)刺激MSCs后收集其條件培養(yǎng)上清,比較觀察其與正常MSCs上清對PC12及其PD模型增殖能力的影響,并用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測兩種上清內(nèi)粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)的含量。結(jié)果1.應(yīng)用組織塊貼壁法分離臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,對分離得到的細(xì)胞培養(yǎng)后進(jìn)行免疫表型鑒定示其高表達(dá)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD105、CD73、CD90,而不表達(dá)造血細(xì)胞表面標(biāo)志CD19、CD34和CD45,符合MSCs表型特征。2.用以上同樣方法檢測加入誘導(dǎo)劑conA的MSCs,經(jīng)過誘導(dǎo)后的MSCs細(xì)胞表型未發(fā)生改變。3.對實(shí)驗(yàn)分離細(xì)胞在不同培養(yǎng)基中進(jìn)行成脂及成骨誘導(dǎo)分化,后分別經(jīng)過ALP染色和Oil red O染色鑒定,實(shí)驗(yàn)中分離的細(xì)胞具有良好的成脂與成骨分化能力。同樣方法鑒定經(jīng)conA處理的MSCs成骨、成脂分化能力未發(fā)生明顯變化。4.經(jīng)過cck-8試劑盒檢測,經(jīng)過Mpp+處理PC12細(xì)胞模型組細(xì)胞數(shù)量是正常組細(xì)胞數(shù)量的一半。5.與對照組相比,MSC條件培養(yǎng)上清可提高PC12細(xì)胞及其帕金森病模型組細(xì)胞的增殖能力,而經(jīng)conA處理后的MSC條件上清對細(xì)胞增殖能力的促進(jìn)作用更加顯著,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.經(jīng)過ELISA檢測,經(jīng)過conA誘導(dǎo)的MSC條件培養(yǎng)上清中G-CSF濃度(33.52pg/mL)顯著高于未經(jīng)處理的MSC上清中的含量(12.03pg/mL)結(jié)論1.實(shí)驗(yàn)分離得到的細(xì)胞為間充質(zhì)干細(xì)胞,conA的誘導(dǎo)不改變其MSC細(xì)胞學(xué)特性。2.PC12細(xì)胞PD細(xì)胞模型造模成功。3.MSCs條件培養(yǎng)上清可以促進(jìn)PC12細(xì)胞及其PD細(xì)胞模型的增殖,G-CSF可能具有顯著促進(jìn)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞增殖的作用。
【關(guān)鍵詞】：間充質(zhì)干細(xì)胞 PC12細(xì)胞 帕金森病 增殖 粒細(xì)胞集落刺激因子
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.5;R-332
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 實(shí)驗(yàn)材料13-17
• 實(shí)驗(yàn)方法17-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-25
• 討論25-31
• 結(jié)論31-32
• 附圖32-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 綜述：造血調(diào)控因子在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用40-53
• 參考文獻(xiàn)48-53
• 附錄53-55
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況55-56
• 致謝56-58
• 個(gè)人簡歷58

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：321566