本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞自噬調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞靜息機(jī)制的初步探討，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：血液細(xì)胞來源于骨髓中極少數(shù)長期造血干細(xì)胞(又稱為多潛能造血干細(xì)胞)(long-term hematopoietic stem cells,LT-HSCs)。在骨髓中LT-HSC分化為短期造血干細(xì)胞(short-term HSCs,ST-HSCs),ST-HSCs進(jìn)一步分化為不同的造血前體細(xì)胞,最終分化為成熟血細(xì)胞。作為血細(xì)胞的“種子”,大部分LT-HSCs分布在封閉的骨髓組織,處于不增殖,不分化,不凋亡的靜息狀態(tài)(quiescence),而干擾LT-HSCs的靜息狀態(tài),會(huì)引起造血干細(xì)胞的異常擴(kuò)增,引起骨髓造血干細(xì)胞的衰竭(exhaustion)或者轉(zhuǎn)化為白血病干細(xì)胞,導(dǎo)致造血功能障礙。因此,維持LT-HSCs的靜息狀態(tài),對(duì)維系骨髓的終生造血能力和應(yīng)激反應(yīng)能力有重要作用。造血干細(xì)胞處于低氧的骨髓微環(huán)境(niche)。在低氧或者營養(yǎng)缺乏的條件下,細(xì)胞自噬(autophagy)通過分解衰老的細(xì)胞器和變性的生物大分子為細(xì)胞的生存提供物質(zhì)和能量支持。細(xì)胞自噬是真核生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行周轉(zhuǎn)的重要過程。越來越多的研究表明,細(xì)胞自噬參與調(diào)節(jié)胚胎干細(xì)胞的增殖和分化、胚胎的生長和發(fā)育。但是,因?yàn)槿狈τ行У膭?dòng)物和細(xì)胞模型,有關(guān)細(xì)胞自噬是否以及如何調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞靜息狀態(tài)的機(jī)制還不清楚。在前期研究的基礎(chǔ)上,本文以造血干細(xì)胞系EML為模型,利用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的技術(shù)方法,探討細(xì)胞自噬和造血干細(xì)胞狀態(tài)的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬參與調(diào)節(jié)造血干細(xì)胞的靜息狀態(tài)的維持以及靜息和增殖狀態(tài)的轉(zhuǎn)換。本文的主要結(jié)果包括:1.在EML細(xì)胞系,成功分離兩個(gè)細(xì)胞亞群(LSKCD34-(CD34-)和LSKCD34+(CD34+))。證實(shí)CD34-細(xì)胞處于靜息狀態(tài),CD34+細(xì)胞處于增殖狀態(tài),并且兩群細(xì)胞相互轉(zhuǎn)換。2.基因表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn),CD34-和CD34+兩群細(xì)胞中細(xì)胞自噬相關(guān)基因及其上游轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)存在顯著差異,自噬相關(guān)基因的表達(dá)在CD34-細(xì)胞顯著高于比CD34+細(xì)胞。3.細(xì)胞自噬激活劑rapamycin抑制CD34-細(xì)胞轉(zhuǎn)化為CD34+細(xì)胞,相反,wnt信號(hào)通路重要轉(zhuǎn)錄因子TCF7抑制細(xì)胞自噬,促進(jìn)處于靜息狀態(tài)CD34-細(xì)胞轉(zhuǎn)化為CD34+細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：造血干細(xì)胞 細(xì)胞自噬 靜息 增殖
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R331.2
【目錄】：

• 縮略詞表4-5
• 英文摘要5-7
• 中文摘要7-8
• 1 前言8-9
• 2 材料和方法9-27
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)9-11
• 2.2 Western Blot11-17
• 2.3 Realtime PCR17-20
• 2.4 流式細(xì)胞分析、分選20-22
• 2.5 細(xì)胞周期和增殖分析22-23
• 2.6 基因表達(dá)分析23-24
• 2.7 慢病毒感染EML細(xì)胞24-25
• 2.8 免疫熒光檢測25-27
• 3 結(jié)果27-36
• 4 討論36-38
• 全文總結(jié)38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 文獻(xiàn)綜述 細(xì)胞自噬與造血干細(xì)胞的功能調(diào)節(jié)42-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間撰寫發(fā)表的文章52-53
• 致謝53

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