黃河三角洲耐鹽植物堿蓬內(nèi)生真菌抗腫瘤次生代謝產(chǎn)物的研究
本文關(guān)鍵詞:黃河三角洲耐鹽植物堿蓬內(nèi)生真菌抗腫瘤次生代謝產(chǎn)物的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:癌癥是當(dāng)今世界直接危及人類生命的一種最常見、最嚴(yán)重的疾病之一,嚴(yán)重威脅著人類的健康。近年來,從大自然中尋找毒性低、療效高的天然抗腫瘤活性物質(zhì)逐漸成為腫瘤治療藥物研發(fā)的主要方向。黃河三角洲區(qū)域分布著一些特有的耐鹽野生藥用植物,該類植物的內(nèi)生真菌,由于其特殊的生存環(huán)境及與藥用植物共生的生存方式,形成了獨(dú)特的微生物資源。這些特境微生物資源極有可能代謝產(chǎn)生抗腫瘤活性物質(zhì)。本文選擇黃河三角洲耐鹽植物堿蓬為研究材料,對其內(nèi)生真菌進(jìn)行研究,共分離了9株內(nèi)生真菌,并選擇了其中一株代謝產(chǎn)物較為豐富的赤散囊菌(Eurotium rubrum),對其抗腫瘤活性次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了深入的研究。 簡述如下: 1.對黃河三角洲耐鹽植物堿蓬進(jìn)行了內(nèi)生真菌的研究,共分離得到9株真菌,其中一株代謝產(chǎn)物較為豐富的真菌經(jīng)ITS序列分析鑒其種屬為赤散囊菌(Eurotium rubrum)。 2.初步研究了不同海水濃度的培養(yǎng)基對赤散囊菌(Eurotium rubrum)生長速度的影響,,確定了其發(fā)酵條件。通過硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析和HPLC等分離手段對其次生代謝產(chǎn)物進(jìn)行了深入的研究,共分離得到12個化合物。同時,利用各種現(xiàn)代波譜技術(shù)如質(zhì)譜、核磁共振譜等方法闡明了其化學(xué)結(jié)構(gòu),分別為ConiothyrinoneA,Catenarin, Rubrocristin, Emodin,2-methyleurotinone, Eurotinone,2-O-methyl-9-dehydroxyeurotinone,Cryptoechinuline C,Echinulin,Tardioxopiperazine A,Dihydroauroglaucin和Flavoglaucin。 3.通過DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制活性和斑馬魚抑制血管生成篩選模型對所得化合物進(jìn)行初步抗腫瘤活性測定,發(fā)現(xiàn)化合物Coniothyrinone A具有DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制活性;2-methyleurotinone和Tardioxopiperazine A具有較好的斑馬魚抑制血管生成抑制活性。
【關(guān)鍵詞】:堿蓬內(nèi)生真菌 赤散囊菌 次級代謝產(chǎn)物 抗腫瘤活性
【學(xué)位授予單位】:山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R3416;Q939.9
【目錄】:
- 目錄4-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 第一章 文獻(xiàn)綜述10-18
- 引言10-11
- 1.1 植物內(nèi)生真菌與植物內(nèi)生真菌活性代謝產(chǎn)物11-12
- 1.1.1 內(nèi)生真菌概述11
- 1.1.2 植物內(nèi)生真菌抗腫瘤研究進(jìn)展11-12
- 1.2 堿蓬內(nèi)生真菌研究進(jìn)展12-13
- 1.2.1 堿蓬概述12
- 1.2.2 堿蓬內(nèi)生真菌的種類12-13
- 1.3 散囊菌次級代謝產(chǎn)物的研究進(jìn)展13-14
- 1.3.1 散囊菌概述13
- 1.3.2 散囊菌的次級代謝產(chǎn)物的研究13-14
- 1.4 抗腫瘤藥物篩選模型14-15
- 1.4.1 概述14
- 1.4.2 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制活性模型14-15
- 1.4.3 斑馬魚篩選模型15
- 1.5 研究背景思路與目的意義15-18
- 1.5.1 研究背景15-16
- 1.5.2 研究思路16-17
- 1.5.3 研究目的與意義17-18
- 第二章 堿蓬內(nèi)生真菌的分離鑒定和培養(yǎng)18-31
- 引言18
- 2.1 材料與方法18-24
- 2.1.1 植物來源18
- 2.1.2 培養(yǎng)基18-20
- 2.1.3 主要儀器20
- 2.1.4 主要試劑20
- 2.1.5 內(nèi)生菌的分離20-21
- 2.1.6 內(nèi)生真菌的鑒定21-23
- 2.1.7 培養(yǎng)條件優(yōu)化23
- 2.1.8 不同海水濃度大米培養(yǎng)基發(fā)酵粗提物的分析23-24
- 2.1.9 大量發(fā)酵24
- 2.2 結(jié)果與分析24-29
- 2.2.1 內(nèi)生真菌的分離24-27
- 2.2.2 內(nèi)生真菌的鑒定27-28
- 2.2.3 培養(yǎng)基優(yōu)化28
- 2.2.4 不同海水濃度大米培養(yǎng)基發(fā)酵粗提物的分析28-29
- 2.3 本章小結(jié)29-31
- 第三章 次級代謝產(chǎn)物的分離鑒定31-53
- 引言31
- 3.1 材料與方法31-38
- 3.1.1 主要試劑31
- 3.1.2 主要儀器31-32
- 3.1.3 分離32-33
- 3.1.4 HPLC 純化33-38
- 3.2 結(jié)果分析38-52
- 3.2.1 分離到的化合物38-39
- 3.2.2 結(jié)構(gòu)解析39-50
- 3.2.3 化合物波譜數(shù)據(jù)50-52
- 3.3 本章小結(jié)52-53
- 第四章 抗腫瘤活性的測定53-62
- 引言53
- 4.1 材料與方法53-56
- 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料53-54
- 4.1.2 主要儀器54
- 4.1.3 主要試劑54
- 4.1.4 質(zhì)粒 pBR322 的制備54-55
- 4.1.5 Topo I 抑制活性的測定55-56
- 4.1.6 斑馬魚血管生成抑制篩選56
- 4.2 結(jié)果與分析56-60
- 4.2.1 Topo I 抑制活性56-57
- 4.2.2 斑馬魚血管生成抑制活性57-60
- 4.3 本章小結(jié)60-62
- 第五章 實(shí)驗(yàn)結(jié)論與討論62-63
- 5.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論62
- 5.2 實(shí)驗(yàn)展望62-63
- 參考文獻(xiàn)63-70
- 致謝70-71
- 附錄71-79
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:黃河三角洲耐鹽植物堿蓬內(nèi)生真菌抗腫瘤次生代謝產(chǎn)物的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:320316
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