目的探討日本血吸蟲重組Tsp2/Sj29 ku表膜蛋白疫苗對小鼠的抗病免疫效果。方法 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku重組菌經(jīng)異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導表達,制備純化的重組蛋白。29只6周齡雌性昆明鼠隨機分為蛋白疫苗組、硫氧還蛋白組和空白對照組,前兩組各10只,空白對照組9只。蛋白疫苗組,第一次免疫每鼠經(jīng)背部皮下多點注射用等體積弗氏完全佐劑乳化的50μg SjTsp2/Sj29 ku重組表膜蛋白,第12、24天每鼠皮下多點再次注射用等體積弗氏不完全佐劑乳化的50μg該重組蛋白。硫氧還蛋白組的免疫方法同蛋白疫苗組�？瞻讓φ战M用生理鹽水代替蛋白,免疫方法同前。末次免疫后第10天,每鼠經(jīng)腹部皮膚感染日本血吸蟲尾蚴（30±2）條。于感染45 d后剖殺全部實驗小鼠,計算減蟲率和減卵率。眼眶取血,分離血清,間接性ELISA法檢測IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM抗體亞型,同時檢測血清細胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白介素4（IL-4）水平。結(jié)果 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku菌經(jīng)IPTG誘導可大量表達,經(jīng)變性、復(fù)性獲得純化的日本血吸蟲Tsp2... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學學報. 2014,49(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 菌株
        1.1.3 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重組菌鑒定
        1.2.2 Sj Tsp2/Sj29 ku重組蛋白的制備
        1.2.3 小鼠免疫保護性試驗
        1.2.4 血清抗體亞型檢測
        1.2.5 細胞因子IL-4、IFN-γ檢測
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結(jié)果
    2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重組基因測序鑒定
    2.2 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku融合蛋白的表達及SDS-PAGE分析
    2.3 重組蛋白的免疫保護作用
    2.4 抗體亞型Ig G1、Ig G2a、Ig G2b、Ig G3和Ig M檢測
    2.5 小鼠血清細胞因子檢測
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3201418