目的探討日本血吸蟲重組Tsp2/Sj29 ku表膜蛋白疫苗對小鼠的抗病免疫效果。方法 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku重組菌經(jīng)異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導(dǎo)表達(dá),制備純化的重組蛋白。29只6周齡雌性昆明鼠隨機分為蛋白疫苗組、硫氧還蛋白組和空白對照組,前兩組各10只,空白對照組9只。蛋白疫苗組,第一次免疫每鼠經(jīng)背部皮下多點注射用等體積弗氏完全佐劑乳化的50μg SjTsp2/Sj29 ku重組表膜蛋白,第12、24天每鼠皮下多點再次注射用等體積弗氏不完全佐劑乳化的50μg該重組蛋白。硫氧還蛋白組的免疫方法同蛋白疫苗組�？瞻讓φ战M用生理鹽水代替蛋白,免疫方法同前。末次免疫后第10天,每鼠經(jīng)腹部皮膚感染日本血吸蟲尾蚴（30±2）條。于感染45 d后剖殺全部實驗小鼠,計算減蟲率和減卵率。眼眶取血,分離血清,間接性ELISA法檢測IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM抗體亞型,同時檢測血清細(xì)胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白介素4（IL-4）水平。結(jié)果 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)可大量表達(dá),經(jīng)變性、復(fù)性獲得純化的日本血吸蟲Tsp2... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2014,49(10)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 菌株
        1.1.3 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重組菌鑒定
        1.2.2 Sj Tsp2/Sj29 ku重組蛋白的制備
        1.2.3 小鼠免疫保護(hù)性試驗
        1.2.4 血清抗體亞型檢測
        1.2.5 細(xì)胞因子IL-4、IFN-γ檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku重組基因測序鑒定
    2.2 pet32a/Sj Tsp2/Sj29 ku融合蛋白的表達(dá)及SDS-PAGE分析
    2.3 重組蛋白的免疫保護(hù)作用
    2.4 抗體亞型Ig G1、Ig G2a、Ig G2b、Ig G3和Ig M檢測
    2.5 小鼠血清細(xì)胞因子檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]核酸疫苗初免-蛋白疫苗加強的免疫策略提高日本血吸蟲核酸疫苗免疫效果[J]. 劉秉春,崔新潔,羅新松,王瀟.  生物工程學(xué)報. 2013(06)
[2]2011年全國血吸蟲病疫情通報[J]. 鄭浩,張利娟,朱蓉,許靜,李石柱,郭家鋼,肖寧,周曉農(nóng).  中國血吸蟲病防治雜志. 2012(06)
[3]血吸蟲病疫苗研究的回顧與展望[J]. 柳建發(fā),廖奇.  寧波大學(xué)學(xué)報(理工版). 2012(04)
[4]ICOSL敲基因小鼠日本血吸蟲病模型的免疫應(yīng)答及其免疫病理（英文）[J]. 王瑜,王波,梁松,龔唯,張惠琴,夏超明.  中國人獸共患病學(xué)報. 2012(08)
[5]日本血吸蟲DNA疫苗聯(lián)合免疫的研究進(jìn)展[J]. 馮其梅,張樹菊,汪世平.  中國人獸共患病學(xué)報. 2012(07)
[6]日本血吸蟲P14鈣結(jié)合蛋白樣蛋白基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)和鑒定[J]. 汪禮文,唐小牛,姚湧,汪學(xué)龍.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2011(04)
[7]日本血吸蟲基因重組抗原rSj06868對小鼠的免疫保護(hù)效果[J]. 王素娟,劉金明,邢榮鶴,石耀軍,金亞美,李浩,林矯矯.  中國動物傳染病學(xué)報. 2011(02)
[8]日本血吸蟲重組抗原SjPGAM-SjEnol的保護(hù)性免疫效果評價[J]. 郭凡吉,王艷,李曄,彭金彪,洪煬,邱春輝,陳實,傅志強,石耀軍,林矯矯.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2010(04)
[9]日本血吸蟲雙表膜抗原融合基因原核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 劉淼,朱海玉,彭強,徐廣文,王盈,沈際佳.  中國生物制品學(xué)雜志. 2010(02)



本文編號：3201418