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調(diào)控S1P1受體信號通路對糖氧剝后星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響

發(fā)布時間:2017-04-21 10:10

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【摘要】:目的:觀察鞘氨醇1-磷酸1型受體(The sphingosine 1-phosphate receptor,S1P1R)抑制劑W146對糖氧剝奪(Oxygen-glucose deprivation,OGD)后星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力的影響。方法:取出生后3天內(nèi)SD(Sprague-Dawley)乳鼠大腦皮層組織進行星形膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)。取第三代細(xì)胞予以免疫熒光鑒定其純度后進行后續(xù)試驗步驟。采用免疫熒光雙標(biāo)法檢測S1P1R在星形膠質(zhì)細(xì)胞上的表達。將接種于培養(yǎng)皿中的細(xì)胞隨機分為3組:CONTROL組、OGD/R組以及OGD/R+W146組。OGD處理細(xì)胞2小時模擬缺氧環(huán)境建立星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧模型,恢復(fù)糖氧供應(yīng)時CONTROL組細(xì)胞予以普通培養(yǎng)基、OGD/R組細(xì)胞予以培養(yǎng)基+等濃度藥物溶劑(無水乙醇)、OGD/R+W146組細(xì)胞予以培養(yǎng)基+W146(10u M);謴(fù)糖氧供應(yīng)后3h、6h、12h以及24h時間點行EDU、流式細(xì)胞術(shù)檢測處于增殖期(S期)細(xì)胞比率;恢復(fù)糖氧供應(yīng)后12h、24h、48h、72h時點,行噻唑藍(MTT)檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活性;蛋白免疫印跡法檢測S1P1R蛋白表達水平。結(jié)果:S1P1R在星形膠質(zhì)細(xì)胞上有表達。OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力升高:與CONTROL組相比,OGD組細(xì)胞增殖活性顯著增加(P0.05),處于S期細(xì)胞比率明顯增加,S1P1R蛋白表達水平上調(diào),有統(tǒng)計學(xué)意義(6h和12h,P0.05)。與OGD/R組相比,W146干預(yù)后可抑制OGD/R組星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力,細(xì)胞增殖活性下降,處于S期的細(xì)胞比率明顯降低(6h和12h,P0.05)。W146干預(yù)后OGD/R+W146組S1P1R蛋白較OGD/R組下降(6h和12h,P0.05)。結(jié)論:W146抑制OGD后星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】:S1P1R W146 OGD/R 星形膠質(zhì)細(xì)胞 增殖
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R329.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-8
  • 英漢縮略詞對照表8-10
  • 第1章 前言10-14
  • 第2章 實驗儀器和試劑14-16
  • 第3章 實驗方法16-24
  • 第4章 實驗結(jié)果24-32
  • 第5章 討論32-36
  • 第6章 結(jié)論36-38
  • 參考文獻38-42
  • 文獻綜述42-48
  • 參考文獻46-48
  • 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果48-50
  • 致謝50

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1 姚柏春,黃翔;杏仁核注射Aβ_(1-42)大鼠腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化[J];醫(yī)學(xué)動物防制;2004年06期

2 何丹;謝敏杰;王偉;魏文潔;喻志源;;低滲對體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2011年04期

3 梁華征,劉穎;腺苷類物質(zhì)及其受體在反應(yīng)性星形膠質(zhì)化過程中的作用[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);2005年01期

4 李軍杰,宋e

本文編號:320097


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