“促育生精方”調(diào)節(jié)環(huán)磷酰胺致少弱精癥模型大鼠精子特異性鈣通道CatSper1、CatSper2的機(jī)制研究
發(fā)布時間:2017-04-20 01:06
本文關(guān)鍵詞:“促育生精方”調(diào)節(jié)環(huán)磷酰胺致少弱精癥模型大鼠精子特異性鈣通道CatSper1、CatSper2的機(jī)制研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的探討“促育生精方”對環(huán)磷酰胺(CP)致少弱精癥模型大鼠精子特異性鈣通道蛋白Cat Sper1、Cat Sper2的影響,并探討其調(diào)節(jié)機(jī)制,為該方的臨床療效提供可靠的科學(xué)依據(jù)。方法將50只雄性、13周齡Wistar大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)6天,隨機(jī)分為模型組(MG)、空白對照組(BCG)、低劑量藥物組(LDCG)、中劑量藥物組(MDCG)、高劑量藥物組(HDCG),每組十只。BCG腹腔注射生理鹽水;MG、LDCG、MDCG、HDCG腹腔注射CP30mg/(kg·d),共5天。建立大鼠少弱精子癥模型后,LDCG、MDCG、HDCG大鼠每天3ml促育生精方免煎顆粒藥液灌胃,(低、中、高劑量對映濃度為1.73mg/ml、3.47mg/ml、6.93mg/ml),BCG和MG用生理鹽水灌胃,持續(xù)30天。末次給藥24 h后,迅速取出動物精子標(biāo)本。光學(xué)顯微鏡檢測精子數(shù)目、精子活力,用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,采用實(shí)時熒光定量PCR法檢測Cat Sper1 m RNA、Cat Sper2m RNA在各組大鼠精子中的表達(dá);用蛋白免疫印跡法檢測Cat Sper1蛋白,Cat Sper2蛋白的表達(dá)。結(jié)果成功建立少弱精子癥大鼠模型。與BCG比較,MG的精子數(shù)目、a級、a+b級精子比率,細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、Cat Sper1 m RNA、Cat Sper2 m RNA及其相應(yīng)蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05);與MG比較,各劑量藥物治療組精子數(shù)目均增加(P0.05),MDCG、HDCG的a級、a+b級精子比率、細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、Catsper1 m RNA、Catsper2 m RNA及其相應(yīng)蛋白表達(dá)量顯著顯著增加(P0.05)。結(jié)論促育生精方可以提高環(huán)磷酰胺致少弱精癥模型大鼠精子數(shù),提高精子尾部鞭毛特異性鈣通道Cat Sper1、Cat Sper2基因及其相應(yīng)蛋白的表達(dá),從而增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,提高精子活率及活力。
【關(guān)鍵詞】:促育生精方 環(huán)磷酰胺 少弱精癥 Cat Sper1 Cat Sper2
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R285.5;R-332
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-6
- 引言6-8
- 第1章 材料與方法8-23
- 1.1 主要儀器設(shè)備8-9
- 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及材料9-13
- 1.3 實(shí)驗(yàn)動物13
- 1.4 藥物制備13-14
- 1.5 動物處理14
- 1.6 標(biāo)本采集14
- 1.7 檢測促育生精方對大鼠精子數(shù)目、活動力的影響14-15
- 1.8 精子胞漿Ca2+含量測定15
- 1.9 促育生精方對精子CatSper1、CatSper2基因表達(dá)影響檢測15-19
- 1.10 促育生精方對精子CatSper1、CatSper2蛋白的影響19-22
- 1.11 統(tǒng)計學(xué)分析22-23
- 第2章 結(jié)果23-34
- 2.1 動物實(shí)驗(yàn)23-24
- 2.2 精子檢測結(jié)果24-26
- 2.3 促育生精方對細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度的影響26-28
- 2.4 促育生精方對精子CatSper1、CatSper2基因表達(dá)的影響28-32
- 2.5 促育生精方對精子CatSper1、CatSper2蛋白表達(dá)的影響32-34
- 第3章 討論34-40
- 3.1 促育生精方組成與制劑工藝34-35
- 3.2 動物模型的建立35-36
- 3.3 促育生精方對精子數(shù)目與活力的影響36-37
- 3.4 促育生精方對CatSper1、CatSper2基因的影響37-38
- 3.5 促育生精方對CatSper1、CatSper2蛋白的影響38
- 3.6 促育生精方對細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響38-40
- 結(jié)論40-41
- 參考文獻(xiàn)41-44
- 綜述1中醫(yī)治療少弱精癥的研究進(jìn)展44-56
- 綜述1參考文獻(xiàn)53-56
- 綜述2 促育生精方質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究56-61
- 參考文獻(xiàn)60-61
- 致謝61-62
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條
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本文關(guān)鍵詞:“促育生精方”調(diào)節(jié)環(huán)磷酰胺致少弱精癥模型大鼠精子特異性鈣通道CatSper1、CatSper2的機(jī)制研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:317552
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