生精細胞體外培養(yǎng)的研究
發(fā)布時間:2021-04-23 07:43
本研究的目的是通過動物實驗探討生精細胞(spermatogenic cell)的分離方法、生精細胞體外培養(yǎng)過程中添加睪酮的濃度和與支持細胞(Sertoli cell)共同培養(yǎng)(coculture)的條件、生精細胞發(fā)育階段的鑒定方法,以及精子細胞體外培養(yǎng)的條件,在此實驗基礎(chǔ)上研究人類生精細胞的體外培養(yǎng),為解決無精子癥(azoospermia)患者的治療奠定理論基礎(chǔ)和實驗方法。 本研究分動物實驗和人類生精細胞培養(yǎng)兩階段進行。 第一階段動物實驗包括五個實驗內(nèi)容。 實驗一探討大鼠生精細胞分離的方法:采用研磨-Percoll法、單一酶-研磨-Percoll法、組合酶法(combination of enzymatic digestion)等三種方法分離睪丸組織,分別對分離出的細胞總數(shù)、分離所需的時間、活細胞率等項目進行比較。結(jié)果三種分離方法中以組合酶法得到的細胞總數(shù)最多、活細胞率最高、分離所需時間最短(P<0.05)。檢測培養(yǎng)48h的分離的細胞存活率,結(jié)果用組合酶法制備的細胞的存活率比其他兩種分離方法高(P<0.05),但培養(yǎng)過程中細胞死亡率比其他兩組高,而在統(tǒng)計學上無顯著性差...
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 睪丸未成熟生精細胞體外培養(yǎng)的研究進展(文獻綜述)
第二部分 生精細胞體外培養(yǎng)的研究(動物實驗)
實驗一 生精細胞分離與純化方法的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗二 生精細胞體外培養(yǎng)過程中添加睪酮濃度的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗三 生精細胞與支持細胞體外共培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗四 生精細胞體外培養(yǎng)的鑒定
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗五 精子細胞體外培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
第三部分 人類生精細胞的體外培養(yǎng)
人類生精細胞體外培養(yǎng)的初步研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
研究結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]兩種方法測定羊外周血淋巴細胞增殖的研究[J]. 張為宇,黃維義,Chauvin Alain. 中國獸醫(yī)雜志. 2003(06)
[2]小牛血清及維生素對小鼠生精上皮細胞凍存的影響[J]. 李蓮軍,李德雪,張學明,岳占碰,文興豪,羅秉坤. 中華男科學. 2002(04)
[3]小鼠睪丸精子細胞的分離與鑒定[J]. 朱培元,黃宇烽,徐建平. 中華男科學. 2002(01)
[4]小鼠精原細胞的分離和純化[J]. 張學明,賴良學,李德雪,李子義,文興豪,杜惜明,岳占碰,王延釗. 解剖學報. 2000(03)
[5]Vero細胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學學報. 2000(03)
[6]雞內(nèi)耳感覺上皮細胞的自然增殖狀態(tài)[J]. 肖紅俊,汪吉寶. 中華耳鼻咽喉科雜志. 1997(01)
本文編號:3154929
【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 睪丸未成熟生精細胞體外培養(yǎng)的研究進展(文獻綜述)
第二部分 生精細胞體外培養(yǎng)的研究(動物實驗)
實驗一 生精細胞分離與純化方法的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗二 生精細胞體外培養(yǎng)過程中添加睪酮濃度的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗三 生精細胞與支持細胞體外共培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗四 生精細胞體外培養(yǎng)的鑒定
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實驗五 精子細胞體外培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
第三部分 人類生精細胞的體外培養(yǎng)
人類生精細胞體外培養(yǎng)的初步研究
1 材料與方法
2 實驗結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
研究結(jié)論
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]兩種方法測定羊外周血淋巴細胞增殖的研究[J]. 張為宇,黃維義,Chauvin Alain. 中國獸醫(yī)雜志. 2003(06)
[2]小牛血清及維生素對小鼠生精上皮細胞凍存的影響[J]. 李蓮軍,李德雪,張學明,岳占碰,文興豪,羅秉坤. 中華男科學. 2002(04)
[3]小鼠睪丸精子細胞的分離與鑒定[J]. 朱培元,黃宇烽,徐建平. 中華男科學. 2002(01)
[4]小鼠精原細胞的分離和純化[J]. 張學明,賴良學,李德雪,李子義,文興豪,杜惜明,岳占碰,王延釗. 解剖學報. 2000(03)
[5]Vero細胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學學報. 2000(03)
[6]雞內(nèi)耳感覺上皮細胞的自然增殖狀態(tài)[J]. 肖紅俊,汪吉寶. 中華耳鼻咽喉科雜志. 1997(01)
本文編號:3154929
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