生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-23 07:43
本研究的目的是通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討生精細(xì)胞(spermatogenic cell)的分離方法、生精細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中添加睪酮的濃度和與支持細(xì)胞(Sertoli cell)共同培養(yǎng)(coculture)的條件、生精細(xì)胞發(fā)育階段的鑒定方法,以及精子細(xì)胞體外培養(yǎng)的條件,在此實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上研究人類生精細(xì)胞的體外培養(yǎng),為解決無(wú)精子癥(azoospermia)患者的治療奠定理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)方法。 本研究分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人類生精細(xì)胞培養(yǎng)兩階段進(jìn)行。 第一階段動(dòng)物實(shí)驗(yàn)包括五個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。 實(shí)驗(yàn)一探討大鼠生精細(xì)胞分離的方法:采用研磨-Percoll法、單一酶-研磨-Percoll法、組合酶法(combination of enzymatic digestion)等三種方法分離睪丸組織,分別對(duì)分離出的細(xì)胞總數(shù)、分離所需的時(shí)間、活細(xì)胞率等項(xiàng)目進(jìn)行比較。結(jié)果三種分離方法中以組合酶法得到的細(xì)胞總數(shù)最多、活細(xì)胞率最高、分離所需時(shí)間最短(P<0.05)。檢測(cè)培養(yǎng)48h的分離的細(xì)胞存活率,結(jié)果用組合酶法制備的細(xì)胞的存活率比其他兩種分離方法高(P<0.05),但培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞死亡率比其他兩組高,而在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)顯著性差...
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 睪丸未成熟生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究進(jìn)展(文獻(xiàn)綜述)
第二部分 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究(動(dòng)物實(shí)驗(yàn))
實(shí)驗(yàn)一 生精細(xì)胞分離與純化方法的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)二 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中添加睪酮濃度的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)三 生精細(xì)胞與支持細(xì)胞體外共培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)四 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的鑒定
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)五 精子細(xì)胞體外培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
第三部分 人類生精細(xì)胞的體外培養(yǎng)
人類生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的初步研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
研究結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩種方法測(cè)定羊外周血淋巴細(xì)胞增殖的研究[J]. 張為宇,黃維義,Chauvin Alain. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2003(06)
[2]小牛血清及維生素對(duì)小鼠生精上皮細(xì)胞凍存的影響[J]. 李蓮軍,李德雪,張學(xué)明,岳占碰,文興豪,羅秉坤. 中華男科學(xué). 2002(04)
[3]小鼠睪丸精子細(xì)胞的分離與鑒定[J]. 朱培元,黃宇烽,徐建平. 中華男科學(xué). 2002(01)
[4]小鼠精原細(xì)胞的分離和純化[J]. 張學(xué)明,賴良學(xué),李德雪,李子義,文興豪,杜惜明,岳占碰,王延釗. 解剖學(xué)報(bào). 2000(03)
[5]Vero細(xì)胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[6]雞內(nèi)耳感覺(jué)上皮細(xì)胞的自然增殖狀態(tài)[J]. 肖紅俊,汪吉寶. 中華耳鼻咽喉科雜志. 1997(01)
本文編號(hào):3154929
【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 睪丸未成熟生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究進(jìn)展(文獻(xiàn)綜述)
第二部分 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究(動(dòng)物實(shí)驗(yàn))
實(shí)驗(yàn)一 生精細(xì)胞分離與純化方法的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)二 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中添加睪酮濃度的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)三 生精細(xì)胞與支持細(xì)胞體外共培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)四 生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的鑒定
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
實(shí)驗(yàn)五 精子細(xì)胞體外培養(yǎng)條件的研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
第三部分 人類生精細(xì)胞的體外培養(yǎng)
人類生精細(xì)胞體外培養(yǎng)的初步研究
1 材料與方法
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論
研究結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]兩種方法測(cè)定羊外周血淋巴細(xì)胞增殖的研究[J]. 張為宇,黃維義,Chauvin Alain. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2003(06)
[2]小牛血清及維生素對(duì)小鼠生精上皮細(xì)胞凍存的影響[J]. 李蓮軍,李德雪,張學(xué)明,岳占碰,文興豪,羅秉坤. 中華男科學(xué). 2002(04)
[3]小鼠睪丸精子細(xì)胞的分離與鑒定[J]. 朱培元,黃宇烽,徐建平. 中華男科學(xué). 2002(01)
[4]小鼠精原細(xì)胞的分離和純化[J]. 張學(xué)明,賴良學(xué),李德雪,李子義,文興豪,杜惜明,岳占碰,王延釗. 解剖學(xué)報(bào). 2000(03)
[5]Vero細(xì)胞培養(yǎng)特性的研究[J]. 房廉潔,呂曉萍,董麗華. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(03)
[6]雞內(nèi)耳感覺(jué)上皮細(xì)胞的自然增殖狀態(tài)[J]. 肖紅俊,汪吉寶. 中華耳鼻咽喉科雜志. 1997(01)
本文編號(hào):3154929
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