幽門螺桿菌 （Helicobacter pylori, Hp） 的高感染率及其嚴(yán)重的危害性,使Hp疫苗成為醫(yī)學(xué)微生物領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，為探討過氧化氫酶（Catalase, KatA）作為基因工程疫苗候選抗原在防治Hp 感染中的作用，本研究采用PCR方法從Hp臨床分離株中克隆katA基因（katA），構(gòu)建Hp過氧化氫酶高效表達(dá)載體，并對重組工程菌的表達(dá)條件進(jìn)行優(yōu)化；重組蛋白KatA（rKatA）經(jīng)鎳離子親和層析純化后，以Western blot、ELISA及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測其免疫學(xué)活性。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步采用重疊延伸技術(shù)將大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位（E. coli heat-labile enterotoxin B subunit, LTB）基因（ltB）和katA基因以不同次序進(jìn)行融合并分別在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，篩選較理想的KatA-LTB融合蛋白表達(dá)載體，以期獲得既具有免疫學(xué)活性又具有粘膜佐劑活性的KatA-LTB融合蛋白，為進(jìn)一步研制Hp分子內(nèi)佐劑亞單位疫苗奠定基礎(chǔ)。全文結(jié)果與結(jié)論如下：1．采用PCR技術(shù)分別從我國臨床分離的Hp菌株及國際標(biāo)準(zhǔn)菌株NCTC11637中克隆了Hp ka... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
論文正文：幽門螺桿菌KatA及KatA與大腸桿菌LTB融合蛋白的表達(dá)研究
    前言
    第一部分 幽門螺桿菌過氧化氫酶的基因克隆、表達(dá)及免疫學(xué)活性研究
        第一節(jié) 幽門螺桿菌過氧化氫酶的基因克隆、表達(dá)
            實(shí)驗(yàn)材料
            實(shí)驗(yàn)方法
            結(jié)果
        第二節(jié) 幽門螺桿菌過氧化氫酶的高效表達(dá)與純化
            實(shí)驗(yàn)材料
            實(shí)驗(yàn)方法
            結(jié)果
        第三節(jié) 重組蛋白的免疫學(xué)活性研究
            實(shí)驗(yàn)材料
            實(shí)驗(yàn)方法
            結(jié)果
        討論
    第二部分 幽門螺桿菌KatA與大腸桿菌LTB融合蛋白的表達(dá)
        實(shí)驗(yàn)材料
        實(shí)驗(yàn)方法
        結(jié)果
        討論
    全文總結(jié)
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 自由基損傷在幽門螺桿菌相關(guān)胃病中的作用
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間撰寫的文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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