蛋白質(zhì)序列分析是蛋白質(zhì)研究中的核心技術(shù)。N端測(cè)序已經(jīng)成為十分完善的技術(shù)，并已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化。C端與N端一樣，在蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析中具有重要地位，不僅對(duì)N端封閉的蛋白質(zhì)進(jìn)行序列測(cè)定，而且對(duì)基因克隆具有指導(dǎo)意義。盡管Schlack-Kumpf降解法的研究進(jìn)展緩慢，但是近十年研究表明該方法是很有希望成為C端順序測(cè)定的常規(guī)方法。 在蛋白質(zhì)C端（異）硫氰酸法順序測(cè)定技術(shù)中，標(biāo)準(zhǔn)氨基酸乙內(nèi)酰硫脲（TH-AA）的制備是必須首先要解決的問題。本文以L-型氨基酸為原料，采用乙酸酐做活化試劑，TBS-ITC為偶聯(lián)試劑，制備了20種TH-AA，反應(yīng)產(chǎn)物通過RP-HELC進(jìn)行了分離純化。 本文同時(shí)在偶聯(lián)試劑方面進(jìn)行了探索，采用合成的13肽（NH₂-KKESDFLMFVYLV-COOH）為模型肽，并偶聯(lián)到DITC玻璃珠上進(jìn)行了方法學(xué)研究。通過實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化對(duì)C-端序列分析的化學(xué)方法進(jìn)行了微量化探索，在0.5nmol規(guī)�？色@得三個(gè)氨基酸C-端序列信號(hào)。改變偶聯(lián)試劑的濃度發(fā)現(xiàn)在0.2mol／L可獲得最佳的偶聯(lián)效果。同時(shí)應(yīng)用兩種偶聯(lián)試劑TBS-ITC和TPGe-ITC進(jìn)行了C-端序列... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
第一部分 C-端序列分析的方法學(xué)研究
    第一章 前言
    第二章 標(biāo)準(zhǔn)氨基酸乙內(nèi)酰硫脲的制備
    第三章 合成用于方法學(xué)研究的模型肽
    第四章 兩種偶聯(lián)試劑序列分析的比較
    第五章 進(jìn)一步研究設(shè)想
第二部分 有關(guān)虎紋鎮(zhèn)痛肽的性質(zhì)研究
    第一章 HWAP-Ⅰ活性單位測(cè)定
    第二章 HWAP-Ⅰ的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
參考文獻(xiàn)
致謝
原創(chuàng)性聲明


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]利用飛行時(shí)間質(zhì)譜進(jìn)行蛋白質(zhì)和多肽C端序列測(cè)定[J]. 陳平,梁宋平.  湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào). 2001(01)
[2]蛋白質(zhì)C端（異）硫氰酸法序列測(cè)定反應(yīng)機(jī)理及進(jìn)展[J]. 莫碧蘭,李江,梁宋平.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1999(03)
[3]質(zhì)譜離子化技術(shù)及其發(fā)展[J]. 李悅,王慧敏.  中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志. 1998(11)
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[5]一種用于蛋白質(zhì)C端序列測(cè)定的脯氨酸乙內(nèi)酰硫脲（TH-Pro）新制備方法[J]. 莫碧蘭,李江,梁宋平.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 1998(02)
[6]蛋白質(zhì)和多肽 C 端氨基酸序列研究進(jìn)展[J]. 屠紅旻,夏其昌.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1993(03)



本文編號(hào)：3127339