發(fā)布時間：2021-04-08 14:40

　　鉤段螺旋體病是一種廣泛流行的人畜共患疾病，它是由病原鉤端螺旋體所引起的。感染后引起人的急性發(fā)熱和全身組織病理改變，嚴(yán)重者甚至危及生命。在鉤端螺旋體病的早期可以看到血管上皮的損傷，多種器官組織上普遍出現(xiàn)出血點，晚期則出現(xiàn)肝細(xì)胞壞死、黃疸及全身衰竭。 本論文首先以鉤端螺旋體黃疸出血型賴株（Leptospira interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae serovar lai type strain #56601）的基因組DNA為模板，通過PCR的方法獲得了8種溶血素蛋白（LA1029、LA4004、LA0327、LA3937、LA0378、LA1650、LA3050和LA1027）的基因。然后構(gòu)建了這8個基因的表達型重組質(zhì)粒，并在大腸桿菌中成功地表達了這8種溶血素的融合蛋白以及對這8種重組蛋白進行了溶血活性的研究。 實驗結(jié)果表明這8種溶血素重組蛋白，都能在血平板上產(chǎn)生溶血斑，說明它們都具有溶血活性。其中LA1029，LA1027，LA4004和LA3050這四種蛋白都具有鞘磷脂酶的活性，能水解鞘磷脂生成神經(jīng)酰胺。 此外，本論文還考... 

【文章來源】：沈陽藥科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組溶血素的純化

釣端螺旋體重組溶血素溶血活性檢測.

帶有pET2b8空載體的大腸桿菌超聲上清液為空白對照，以鞘磷脂酶C(SphC，51腳aCo.)為陽性對照。取反應(yīng)的有機層1sul點板，進行薄層層析，實驗結(jié)果見圖2一2SPH1234565471sPhC，2LA10293LA40044Pet28bssPh6LA10277LA3050CeeermideSPHsPhingomyelin圖2一2TLC法檢測鉤端螺旋體鞘磷脂酶類溶血素酶活性Fig.2一2TLCdetectionhtesPhingomyelinaseactlvytiofLePtosPiarinte口09田招Pshigomyelinase一likehemolysins4個鞘磷脂酶類溶血素都有不同程度上的水解鞘磷脂能力。其中AL1029的水解能力最強，底物鞘磷脂都被水解，與鞘磷脂酶陽性對照的水解能力相當(dāng)。AL4004和LA1027也有鞘磷脂酶的水解能力，但是活性比LAIO29弱。LA3050的鞘磷脂酶能力最弱，37

【參考文獻】：
期刊論文
[1]鉤端螺旋體外膜菌苗不同劑量的接種反應(yīng)與免疫效果觀察[J]. 張錦麟,謝廣中,秦進才,余錄根,朱鳳才,高吉元,王志高,王琰,胡明生,胡金保.  中國人獸共患病雜志. 1996(05)
[2]鉤端螺旋體病患者血標(biāo)本的快速處理及PCR檢測[J]. 伍衛(wèi)華,李勝富,戴保民.  中國人獸共患病雜志. 1996(02)
[3]中國致病性鉤端螺旋體血清群型及其地區(qū)分布[J]. 于恩庶,秦進才,時曼華,屠云人,楊文映,李慶俊,徐慧棟,梁中興.  中國人獸共患病雜志. 1995(04)
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本文編號：3125745