背景與目的： 腦不對稱可以影響免疫系統(tǒng)，右利、左利和雙利小鼠的部分免疫指標具有異質(zhì)性。腦不對稱也可以影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，腦中多種神經(jīng)遞質(zhì)、細胞因子均與腦不對稱有關。神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡中，下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPA軸）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的重要途徑。在這個途徑中前炎性細胞因子IL-1β、IL-6對HPA軸的激活具有重要作用，主要在海馬、下丘腦水平。本文旨在通過檢測海馬、下丘腦前炎性細胞因子IL-1β、IL-6的水平，來研究腦不對稱影響神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)的可能機制。從而探討腦不對稱影響神經(jīng)內(nèi)分泌的免疫生物學意義材料和方法： Balb／c健康小鼠共98只，雌性，4周齡，經(jīng)伸爪取食法按右利分（伸爪50次中伸右爪的次數(shù)）給每只小鼠評分，將小鼠區(qū)別為左利鼠、右利鼠和雙利鼠3組。0～20分為左利鼠，30～50分為右利鼠，21～29分為雙利鼠。區(qū)分后1周將每組小鼠再分為實驗組和正常生理組。實驗組每只小鼠以LPS（lipopolysaccharide）5μg／0.5mL NS、正常生理組以0.5mL NS腹腔注射。2h后快速斷頭殺鼠，迅速分離出左右雙側(cè)葉海馬、下丘腦，制備10％海馬、下丘腦... 

【文章來源】：汕頭大學廣東省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

總RNA純度分析圖

正常組LPS組6.腦不對稱Balb/c小鼠下丘腦IL一6水平levelsofhyPothalamusinbrainlateralizedBalb/e口iee(n=6:**P<0.01)細胞因子IL一lp、IL一6基因水平PCR實驗結(jié)果下丘腦組織抽提總RNA行甲醛變性凝膠電泳:上可清晰看到285A帶完整，沒有降解和185兩條帶，并隱約可見，可作為逆轉(zhuǎn)錄反應的模板1234567.......................l..............I.I..IIIIII.........285

與預期大小一致(見圖8)。M1231500bP—50()bP4(X)bP300bP圖8.F198.TheMpZ一MG、IL一1日、IL一6引物PCR擴增樣本eDNAresultofsampleeDNAamplifiedbyPrimerpZ一MG、IL一1旦andIL一6:DNAmarker;1:pZ一MG:2:IL一l旦:3:IL一63.1.3pMD18一T質(zhì)粒及其克隆位點、酶切位點(見圖9)圖9.pMD18一T質(zhì)粒及其克隆位點、酶切位點圖F199.PlasmidPMDIS一Tandeloningsite、digestedsiteHind111的酶切位點:AAGCTTEeoRI的酶切位點:GAATTC3.1.4重組質(zhì)粒鑒定(1)PCR鑒定:將初篩的陽性質(zhì)粒作為模板，用所設計的引物進行PCR擴增鑒定，瓊脂糖凝膠電泳均觀察到與目的片段大小一致的條帶(見圖10)。28

【參考文獻】：
期刊論文
[1]小鼠血漿TNF-α、NO、NOS水平與腦不對稱的關系[J]. 付清玲,李康生.  生理學報. 2002(06)
[2]Balb/c小鼠腦不對稱性與其腹腔巨噬細胞分泌IL-1β,NO間關系的研究[J]. 高明霞,李康生,付清玲.  中國神經(jīng)科學雜志. 2002(03)
[3]Balb/c小鼠左右兩側(cè)大腦皮層IL-1β、IL-6含量的不對稱性[J]. 付清玲,李康生.  生理學報. 2001(02)
[4]大鼠海馬對細胞免疫功能調(diào)節(jié)效應[J]. 李康生,楊貴貞.  上海免疫學雜志. 1991(01)



本文編號：3121848