目的研究亨廷頓蛋白相關(guān)蛋白1（Huntingtin-associated protein 1,Hap1）基因?qū)Τ衫w維細(xì)胞增殖的影響。方法體外分離培養(yǎng)獲得Hap1基因敲除(Hap1^-/-)的原代成纖維細(xì)胞,鑒定后采用EdU增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期（流式細(xì)胞術(shù)）檢測(cè)驗(yàn)證Hap1敲除后成纖維細(xì)胞增殖的改變;將野生型和Hap1^-/-成纖維細(xì)胞送轉(zhuǎn)錄組測(cè)序篩選增殖相關(guān)基因,實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）驗(yàn)證相關(guān)基因表達(dá)水平的改變。對(duì)小鼠進(jìn)行皮膚損傷造模檢測(cè)Hap1敲減(Hap1^+/-)小鼠皮膚損傷修復(fù)情況;PCNA免疫組化染色檢測(cè)損傷修復(fù)過(guò)程中成纖維細(xì)胞的增殖水平。結(jié)果成功培養(yǎng)原代Hap1^-/-成纖維細(xì)胞;與野生型成纖維細(xì)胞相比,Hap1^-/-成纖維細(xì)胞EdU陽(yáng)性比例減少,進(jìn)入S期的細(xì)胞比例減少;原代成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序篩選出Cdc25C、E2f7、E2f8和Ccl5四個(gè)差異表達(dá)的增殖相關(guān)基因,qPCR驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)E2f7在Hap1敲除后表達(dá)增多。小鼠皮膚損傷結(jié)果顯示,Hap1^+/-

【文章來(lái)源】：四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019,50(03)北大核心

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圖４小鼠皮膚損傷面積測(cè)量Ｆｉ４Ｃｈａｎｅｓｉｎｓｋｉｎｌｅｓｉｏｎａｒｅａｓｉｎｍｉｃｅ


本文編號(hào)：3090418