本文關(guān)鍵詞：利拉魯肽對高脂喂養(yǎng)大鼠心肌組織自噬的影響及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：自噬(Autophagy)意為自體吞噬,即細胞將自身的物質(zhì)消化清除,它是一種依賴于溶酶體的保守的代謝途徑,是一種基本的細胞代謝過程,主要降解并回收細胞內(nèi)一些長壽命的蛋白質(zhì)以及受損的細胞器,其作用主要是為了維持細胞的自身穩(wěn)定[1]。自噬在維持細胞的生命活動中發(fā)揮著重要作用,它維持細胞的正常功能,以實現(xiàn)細胞代謝、細胞器更新的需要,是細胞內(nèi)的一種自我保護機制,是機體應對體內(nèi)外應激反應的機制之一。正常生理狀態(tài)下的自噬若被抑制會導致體內(nèi)有害物質(zhì)的堆積,而過度的自噬又會破壞細胞的正常結(jié)構(gòu)。因此自噬過度或者是不足均會造成細胞損傷。自噬作為一種普遍的生命現(xiàn)象,廣泛參與了多種生理病理過程。因為自噬活性的改變在多種病理條件下都有重要意義,因此調(diào)控自噬可能成為某些人類疾病的潛在治療靶點。心肌細胞(CMs)是一種長壽命分裂后期細胞,分化再生能力有限,心肌細胞自噬對于維持心臟功能和活性具有重要的作用。在許多心臟疾病中都發(fā)現(xiàn)了蛋白質(zhì)的聚集以及受損細胞器的堆積,比如高血壓,心肌梗塞(MI)以及擴張型心肌病(DCM)[2,3],說明在這些疾病中,自噬水平是不足的。研究表明自噬可影響心肌重構(gòu)以及其它的心臟疾病,因此調(diào)控自噬可能成為心血管疾病防治的潛在靶點之一。有研究表明,高脂喂養(yǎng)的小鼠,其心肌纖維化的程度增加,并且自噬基因LC-3Ⅱ的水平下降,說明高脂飲食可能會導致心肌肥厚并使自噬水平降低。此外,高脂喂養(yǎng)24周的小鼠其心肌組織受到損害,同時心肌的自噬水平受到抑制。胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)是小腸L細胞分泌的一種生理性肽類激素,它可增加胰島素的生物合成和分泌,刺激胰島細胞的增殖和分化,具有多種生理學作用,正逐漸成為糖尿病治療的熱點。目前對于其研究已不僅局限于它對于胰腺的作用,多項研究表明GLP-1對胰腺及腎臟等重要器官都發(fā)揮著保護性的作用,同時在這些器官中觀察到GLP-1與自噬水平的改變有關(guān)[4,5],但其是否影響了心肌的自噬尚不清楚。為此,本研究將觀察利拉魯肽對高脂喂養(yǎng)大鼠心肌組織自噬水平的影響,并探討其作用機制。目的:觀察利拉魯肽對高脂喂養(yǎng)大鼠心肌組織自噬水平的影響,測定自噬相關(guān)分子Beclin 1、LC-3Ⅱ、ATG7、p62的表達,以探討利拉魯肽對高脂狀態(tài)下心肌自噬的影響及其機制發(fā)揮作用的可能機制。方法:40只雄性健康Sprague Dawldy(SD)大鼠(200-250g),適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為5組:正常對照組(給予普通飼料喂養(yǎng)),高脂對照組,高脂+利拉魯肽低(0.4mg/Kg/d)、中(0.6mg/Kg/d)、高(0.8mg/Kg/d)劑量干預組(均給予高脂飼料喂養(yǎng)),每組8只大鼠。各個實驗組分別皮下注射相應劑量的利拉魯肽,正常對照組及高脂對照組給予等體積生理鹽水。每周稱量大鼠體重。實驗12周后腹主動脈放血處死大鼠,收集血清測定血糖、血清甘油三酯(TG),總膽固醇(TC),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),血清BNP水平;Real-Time PCR檢測心肌組織Beclin1、LC-3Ⅱ、ATG7、和p62的mRNA表達;Western-Blot檢測心肌組織Beclin1、LC-3Ⅱ、AMPK、P-AMPK、mTOR和P-mTOR的蛋白表達。結(jié)果:1利拉魯肽對體重的影響:實驗12周末,高脂對照組體重明顯高于正常對照組(P0.05),利拉魯肽低、中、高劑量組體重明顯低于高脂對照組(P0.05),但是利拉魯肽各劑量組體重差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2利拉魯肽對血糖及血脂的影響:實驗12周末,高脂對照組血糖明顯高于正常對照組(P0.05),利拉魯肽低、中、高劑量組明顯低于高脂對照組(P0.05);高脂對照組血清TG水平明顯高于正常對照組(P0.05),利拉魯肽低、中、高劑量組血清TG水平明顯低于高脂對照組(P0.05);高脂對照組血清TC較正常對照組升高但無統(tǒng)計學差異(P0.05),利拉魯肽低、中、高劑量組TC較高脂組降低,但只有高劑量組與其有統(tǒng)計學差異(P0.05);高脂對照組血清LDL-C水平較正常對照組升高,HDL-C水平較正常對照組降低,均無統(tǒng)計學差異(P0.05),利拉魯肽各劑量組LDL-C較高脂對照組降低,HDL-C水平較高脂對照組升高,也均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。3利拉魯肽對血清BNP的影響:實驗12周末,與正常對照組相比較,高脂對照組的BNP水平明顯增加(P0.05),利拉魯肽組明顯低于高脂對照組(P0.05),但是利拉魯肽各劑量組間BNP水平差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4利拉魯肽對心肌組織自噬相關(guān)分子的蛋白及基因表達的影響:實驗12周末,高脂對照組Beclin1、LC-3Ⅱ蛋白表達明顯下調(diào)(P0.05),利拉魯肽各劑量組顯著上調(diào)Beclin1、LC-3Ⅱ蛋白的表達(P0.05),Beclin1、LC-3Ⅱ基因表達同蛋白表達一致,高脂對照組ATG7的mRNA表達明顯下調(diào)(P0.05),P62的mRNA表達明顯上調(diào)(P0.05),利拉魯肽各劑量組則與之相反。5心肌組織AMPK-mTOR通路信號分子的表達:AMPK及mTOR的蛋白在各組間沒有差異(均P0.05)。與正常對照組相比,高脂對照組P-AMPK的蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05),P-mTOR的蛋白表達顯著上調(diào)(P0.05),與高脂對照組相比,利拉魯肽干預后P-AMPK蛋白表達顯著上調(diào)(P0.05),P-mTOR蛋白表達顯著下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:1高脂飲食可以使大鼠的心功能受損,表現(xiàn)為大鼠血清BNP水平的升高,利拉魯肽干預后可以改善這種受損情況。2高脂飲食下調(diào)了心肌組織Beclin1,LC-3Ⅱ,ATG7 mRNA的表達,上調(diào)了p62mRNA的表達,同時上調(diào)AMPK通路蛋白的表達,而利拉魯肽干預可以改善這一狀況。
【關(guān)鍵詞】：利拉魯肽 自噬 心肌組織 高脂飲食 AMPK mTOR
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R363
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-26
• 結(jié)果26-28
• 附圖28-33
• 附表33-35
• 討論35-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻40-42
• 綜述 自噬與糖尿病42-50
• 參考文獻47-50
• 致謝50-51
• 個人簡歷51

【參考文獻】

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1 王曉昊;韓麗娜;余葉蓉;王椿;王r

本文編號：308830