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馬爾尼菲青霉菌隨機擴增多態(tài)性分析

發(fā)布時間:2021-02-21 22:54
  目的 研究馬爾尼菲青霉菌(PM)的基因多態(tài)性,進行PM的基因分型。方法 采用氯化芐提取法提取基因組DNA。用隨機擴增多態(tài)性DNA (RAPD)技術(shù)對12株臨床分離的PM菌株進行了DNA指紋圖譜分析。結(jié)果 ①共選用40個隨機引物進行擴增,篩選出4個具有穩(wěn)定、清晰DNA擴增帶型的引物。即引物P23:5'-AGTCAGCCAC -3',P103:5'-AGACGTCCAC -3',P105:5'-AGTCGTCCCC- 3',P120:5'-GGGAGACATC -3'。②12株菌株RAPD-PCR圖譜主要帶型相同,擴增片段呈多態(tài)性。相似率44.4%~97.3%。③12株P(guān)M菌可分5型。結(jié)論 12株來源于不同地區(qū)馬爾尼菲青霉菌。≒sM)病人的PM(菌絲相),采用RAPD-PCR得到的DNA圖譜呈多態(tài)性,并分為5型。對今后進一步研究PM的流行病學及防治均具有指導意義。 

【文章來源】:廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

馬爾尼菲青霉菌隨機擴增多態(tài)性分析


沙氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)的PM(有色素)

瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)的,玫瑰紅


均不顯任何條帶。結(jié) 果. PM 的培養(yǎng).1 12 株 PM 分別接種于沙氏瓊脂培養(yǎng)基后置于 25℃及 37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。7、8、11、12 號 PM 在 25℃下三天后長白色、淡黃色絨狀菌落,并可見玫瑰紅色的色素溶于培養(yǎng)中。10 天后培養(yǎng)基全部變?yōu)槊倒寮t色,有絨狀氣中菌絲。見圖 1)其余 8 株 PM 因轉(zhuǎn)代較多無玫瑰紅色的色素產(chǎn)生見圖 2)。

引物


圖 3 引物 P105 所擴增帶型 從左到右:Marker:分子量標準對照,1-12 為 12 株 PM。從左到右:M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 M 1 圖 5 引物 P103 所擴增帶型 從左到右:Marker:分子量標準對照,1-12 為 12 株 PM 從左到右:PM。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]馬爾尼菲青霉菌病誤診為支氣管肺炎傷寒1例[J]. 李利,李明,張保慶,米弘瑛,李獻珍.  中國誤診學雜志. 2001(10)
[2]隨機擴增多態(tài)性對白色念珠菌分型的估價[J]. 李冬梅,王瑞禮,李若瑜,朱衡,朱立煌.  真菌學報. 1995(02)
[3]皮肌炎合并馬爾尼菲青霉菌胸膜感染一例報告[J]. 郭慶,鄧錦惠.  中國皮膚性病學雜志. 1992(01)
[4]馬爾尼菲青霉病的血清學診斷[J]. 鄧卓霖,馬韻,李山,葉瓊玉.  廣西醫(yī)學院學報. 1988(04)
[5]馬內(nèi)青霉菌病一例報告[J]. 李菊裳,潘樂泉,鄧作霖,汪周堅,姚翠莉.  臨床皮膚科雜志. 1985 (01)
[6]播散性馬爾尼菲青霉病二例報告[J]. 李菊裳,潘樂泉,蘇士雄,蘇紹波,單蓮英.  中華皮膚科雜志. 1990 (03)



本文編號:3045042

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