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馬爾尼菲青霉菌隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性分析

發(fā)布時(shí)間:2021-02-21 22:54
  目的 研究馬爾尼菲青霉菌(PM)的基因多態(tài)性,進(jìn)行PM的基因分型。方法 采用氯化芐提取法提取基因組DNA。用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA (RAPD)技術(shù)對(duì)12株臨床分離的PM菌株進(jìn)行了DNA指紋圖譜分析。結(jié)果 ①共選用40個(gè)隨機(jī)引物進(jìn)行擴(kuò)增,篩選出4個(gè)具有穩(wěn)定、清晰DNA擴(kuò)增帶型的引物。即引物P23:5'-AGTCAGCCAC -3',P103:5'-AGACGTCCAC -3',P105:5'-AGTCGTCCCC- 3',P120:5'-GGGAGACATC -3'。②12株菌株RAPD-PCR圖譜主要帶型相同,擴(kuò)增片段呈多態(tài)性。相似率44.4%~97.3%。③12株P(guān)M菌可分5型。結(jié)論 12株來(lái)源于不同地區(qū)馬爾尼菲青霉菌。≒sM)病人的PM(菌絲相),采用RAPD-PCR得到的DNA圖譜呈多態(tài)性,并分為5型。對(duì)今后進(jìn)一步研究PM的流行病學(xué)及防治均具有指導(dǎo)意義。 

【文章來(lái)源】:廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】:46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

馬爾尼菲青霉菌隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性分析


沙氏瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)的PM(有色素)

瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)的,玫瑰紅


均不顯任何條帶。結(jié) 果. PM 的培養(yǎng).1 12 株 PM 分別接種于沙氏瓊脂培養(yǎng)基后置于 25℃及 37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。7、8、11、12 號(hào) PM 在 25℃下三天后長(zhǎng)白色、淡黃色絨狀菌落,并可見玫瑰紅色的色素溶于培養(yǎng)中。10 天后培養(yǎng)基全部變?yōu)槊倒寮t色,有絨狀氣中菌絲。見圖 1)其余 8 株 PM 因轉(zhuǎn)代較多無(wú)玫瑰紅色的色素產(chǎn)生見圖 2)。

引物


圖 3 引物 P105 所擴(kuò)增帶型 從左到右:Marker:分子量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,1-12 為 12 株 PM。從左到右:M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 M 1 圖 5 引物 P103 所擴(kuò)增帶型 從左到右:Marker:分子量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,1-12 為 12 株 PM 從左到右:PM。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]馬爾尼菲青霉菌病誤診為支氣管肺炎傷寒1例[J]. 李利,李明,張保慶,米弘瑛,李獻(xiàn)珍.  中國(guó)誤診學(xué)雜志. 2001(10)
[2]隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性對(duì)白色念珠菌分型的估價(jià)[J]. 李冬梅,王瑞禮,李若瑜,朱衡,朱立煌.  真菌學(xué)報(bào). 1995(02)
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[4]馬爾尼菲青霉病的血清學(xué)診斷[J]. 鄧卓霖,馬韻,李山,葉瓊玉.  廣西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 1988(04)
[5]馬內(nèi)青霉菌病一例報(bào)告[J]. 李菊裳,潘樂泉,鄧作霖,汪周堅(jiān),姚翠莉.  臨床皮膚科雜志. 1985 (01)
[6]播散性馬爾尼菲青霉病二例報(bào)告[J]. 李菊裳,潘樂泉,蘇士雄,蘇紹波,單蓮英.  中華皮膚科雜志. 1990 (03)



本文編號(hào):3045042

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