目的:探討urotensin Ⅱ（UⅡ）/UT系統(tǒng)對脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激枯否細胞（Kupffer cell,KC）固有免疫炎癥信號通路Toll樣受體4（Toll-like receptor 4,TLR4）-干擾素調(diào)節(jié)因子3（Interferon regulatory factor 3,IRF3）的影響。方法:采用在體原位灌注、密度梯度離心和早期細胞換液等方法分離純化大鼠KC,并采用墨汁吞噬和ED2染色試驗對分離培養(yǎng)的細胞進行鑒定。采用LPS刺激肝KC。將細胞按照隨機數(shù)字表的方法隨機分成6組,各組細胞處置方法如下:A組:UⅡ（-）urantide（-）LPS（-）;B組:UⅡ（+）urantide（-）LPS（-）;C組:UⅡ（-）urantide（+）LPS（-）;D組:UⅡ（-）urantide（-）LPS（+）;E組:UⅡ（+）urantide（-）LPS（+）;F組:UⅡ（-）urantide（+）LPS（+）。KC培養(yǎng)上清液促炎性細胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析檢測,細胞表面TLR4的表達采用流式細胞技術(shù)分... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
ABSTRACT
引言
材料與方法
    1.原代肝枯否細胞的分離和培養(yǎng)
    2.枯否細胞吞噬功能鑒定（墨汁吞噬試驗）
    3.細胞免疫化學(xué)染色（ED2染色）
    4.大鼠原代肝枯否細胞分組處理
    5.酶聯(lián)免疫吸附分析
    6.實時熒光定量PCR
    7.流式細胞技術(shù)
    8.細胞漿/核蛋白的抽提
    9.蛋白質(zhì)的樣品準備和濃度測定
    10.免疫印跡（Western blot）
    11.統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1.原代枯否細胞分離培養(yǎng)結(jié)果
    2.吞墨實驗
    3.原代枯否細胞ED2染色結(jié)果
    4.UⅡ/UT系統(tǒng)對LPS刺激枯否細胞促炎細胞因子IL-6、IFN-β和 IFN-γ分泌的影響
    5.UⅡ/UT系統(tǒng)對LPS刺激枯否細胞TRL4 表達的影響
    6.UⅡ/UT系統(tǒng)對LPS刺激枯否細胞IRF3 mRNA表達的影響
    7.UⅡ/UT系統(tǒng)對LPS刺激枯否細胞IRF3 蛋白表達的影響
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章和參加的課題
致謝



本文編號：3044995