目的:探討urotensin Ⅱ（UⅡ）/UT系統(tǒng)對(duì)脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激枯否細(xì)胞（Kupffer cell,KC）固有免疫炎癥信號(hào)通路Toll樣受體4（Toll-like receptor 4,TLR4）-干擾素調(diào)節(jié)因子3（Interferon regulatory factor 3,IRF3）的影響。方法:采用在體原位灌注、密度梯度離心和早期細(xì)胞換液等方法分離純化大鼠KC,并采用墨汁吞噬和ED2染色試驗(yàn)對(duì)分離培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。采用LPS刺激肝KC。將細(xì)胞按照隨機(jī)數(shù)字表的方法隨機(jī)分成6組,各組細(xì)胞處置方法如下:A組:UⅡ（-）urantide（-）LPS（-）;B組:UⅡ（+）urantide（-）LPS（-）;C組:UⅡ（-）urantide（+）LPS（-）;D組:UⅡ（-）urantide（-）LPS（+）;E組:UⅡ（+）urantide（-）LPS（+）;F組:UⅡ（-）urantide（+）LPS（+）。KC培養(yǎng)上清液促炎性細(xì)胞因子IL-6、IFN-β和IFN-γ分泌水平采用ELISA分析檢測(cè),細(xì)胞表面TLR4的表達(dá)采用流式細(xì)胞技術(shù)分... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
ABSTRACT
引言
材料與方法
    1.原代肝枯否細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
    2.枯否細(xì)胞吞噬功能鑒定（墨汁吞噬試驗(yàn)）
    3.細(xì)胞免疫化學(xué)染色（ED2染色）
    4.大鼠原代肝枯否細(xì)胞分組處理
    5.酶聯(lián)免疫吸附分析
    6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    7.流式細(xì)胞技術(shù)
    8.細(xì)胞漿/核蛋白的抽提
    9.蛋白質(zhì)的樣品準(zhǔn)備和濃度測(cè)定
    10.免疫印跡（Western blot）
    11.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1.原代枯否細(xì)胞分離培養(yǎng)結(jié)果
    2.吞墨實(shí)驗(yàn)
    3.原代枯否細(xì)胞ED2染色結(jié)果
    4.UⅡ/UT系統(tǒng)對(duì)LPS刺激枯否細(xì)胞促炎細(xì)胞因子IL-6、IFN-β和 IFN-γ分泌的影響
    5.UⅡ/UT系統(tǒng)對(duì)LPS刺激枯否細(xì)胞TRL4 表達(dá)的影響
    6.UⅡ/UT系統(tǒng)對(duì)LPS刺激枯否細(xì)胞IRF3 mRNA表達(dá)的影響
    7.UⅡ/UT系統(tǒng)對(duì)LPS刺激枯否細(xì)胞IRF3 蛋白表達(dá)的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的文章和參加的課題
致謝



本文編號(hào)：3044995