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乙型肝炎病毒全長基因擴增技術(shù)的建立及其在探討宮內(nèi)傳播機理中的初步應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-02-11 00:15
  目的 乙型肝炎病毒(HBV)基因組具有很高的變異性,許多HBV攜帶者個體內(nèi)都存在不同的HBV基因株(即多樣性或異質(zhì)性),不同株的病毒復(fù)制水平、免疫原性和傳播特點等均不同,對疾病的發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的影響也不同。為清晰的了解HBV基因在母嬰體內(nèi)異質(zhì)性的具體狀況,探索HBV基因變異與宮內(nèi)傳播的關(guān)系,本研究建立了乙型肝炎全長聚合酶鏈反應(yīng)(Full-length PCR),可以直接從血清中一次克隆HBV全基因,在此基礎(chǔ)上,對HBsAg陽性孕婦及其新生兒體內(nèi)HBV前S/S基因進行了序列分析。 方法①2000年1月至6月收集西京醫(yī)院檢驗科檢測HBV DNA陽性的乙型肝炎患者血清10例,提取HBV DNA后,建立全長聚合酶鏈反應(yīng),并進行PCR條件優(yōu)化。 ②PCR產(chǎn)物回收純化后克隆入載體,獲得HBV全長基因克隆,同時用PCR、酶切及測序三種方法對其進行鑒定。 ③1997~1998年,由王素萍博士收集太原市傳染病院婦產(chǎn)科HBsAg陽性足月分娩產(chǎn)婦靜脈血及其新生兒出生后24小時內(nèi)股靜脈血共50對,用新建立的HBV全長擴增方法成功擴增HBsAg陽性孕婦HBV DNA共8例,其中發(fā)生宮內(nèi)傳播者4例,... 

【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對照表
前言
第一部分 HBV全長基因擴增方法的建立
    一、 對象及方法
        (一) 研究對象
        (二) 試劑與材料
        (三) 方法
    二、 結(jié)果
    三、 討論
第二部分 HBV病毒前S/S基因異質(zhì)性與宮內(nèi)傳播關(guān)系的初步研究
    一、 對象與方法
    二、 結(jié)果
    三、 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)回顧
參考文獻(xiàn)
致謝
簡歷



本文編號:3028207

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