本文關鍵詞：幽門螺桿菌國內流行株動物模型的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：目前研究幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)在胃炎、胃潰瘍及胃癌等疾病中的致病機制的主要方式是建立動物感染Hp的模型,模擬Hp在人體內的致病機制�，F(xiàn)在國外Hp感染動物模型建立的技術相對成熟。人們成功的從不同動物及人胃中分離出多種螺桿菌,比如貓胃中分離出貓螺旋桿菌(Helicobacter felis,Hf)等。1997年Lee等人從臨床分離出幽門螺桿菌悉尼株(Helicobacter pylori Sydney strain 1 SS1),此菌株能長期有效的定植在實驗動物胃中,并成功的在實驗動物胃中產生慢性炎癥,萎縮性胃炎,腸上皮化生及不典型增生等病理變化�，F(xiàn)在SS1菌株作為國際標準株,被廣泛的應用到動物建模中。用來建立Hp感染模型的動物種類有很多,如沙鼠、小鼠、大鼠、豚鼠、貓、無菌豬、恒河猴等,其中一些動物因價格昂貴、飼養(yǎng)條件高等原因限制其在試驗中的廣泛應用,目前蒙古沙鼠和小鼠較為常用。其中,蒙古沙鼠的Hp感染模型能較好復制Hp在人類的胃中的行為模式,但是蒙古沙鼠也有價格相對較高,飼養(yǎng)方法較復雜,能產生的抗體及引物有限,缺乏基因轉換的特異性等缺陷。最易建立并且容易飼養(yǎng)的嚙齒類動物模型為小鼠,尤其是C57BL/6及FVB小鼠,能夠感染貓螺桿菌及不同種類的Hp,并表現(xiàn)為強烈的輔助性T細胞1(Helper T cell 1,Th1)應答反應,而BALB/c小鼠雖然負荷菌量和C57BL/6差不多,但是其感染后主要產生輔助性T細胞2(Helper T cell 2,Th2)細胞因子,對上皮的損傷較小�，F(xiàn)階段,SS1感染的C57BL/6小鼠已經成為標準模型。在國內,Hp感染相關的動物模型的建立仍處于初級階段,建模成功率較低,動物模型多為SS1菌株感染C57BL/6小鼠或者BALB/c小鼠,還有部分蒙古沙鼠等。因為不同的菌株對于不同的宿主也會有不同的致病性,我國致病性較強的菌株為vac AS1、cagA、iceA1陽性的Hp菌株,若能建立一個我國流行菌株的標準動物模型,對于我國Hp相關消化道疾病的研究能夠建立一個更好的研究平臺。目的：本課題通過文獻閱讀確立空泡細胞毒素AS1 (vacAS1)、細胞毒素相關基因A (cagA)、表皮接觸誘導基因A1 (iceAl)陽性的臨床分離株為目前國內流行株。對6株臨床HP菌株進行基因檢測,選擇vacAS1、cagA、iceAl陽性的菌株作為致病菌。選用無特殊病原體(Specifc pathogen free,SPF)的C57BL/6小鼠為研究對象,來建立國內幽門螺桿菌流行株的動物模型,研究vacAS1、cagA、 iceAl陽性的幽門螺桿菌流行株感染導致的小鼠胃粘膜改變,為進一步研究致病機制、藥物治療、疫苗研究提供更好的動物模型和研究平臺。方法：先對臨床分離的六株幽門螺桿菌行基因組檢查,確認vacAS1、cagA、iceA1陽性的致病株,并進行培養(yǎng)擴增。取60只SPF級C57BL/6小鼠,隨機分為對照組,模型組,每組30只。對照組正常飼養(yǎng),模型組經口灌服vacAS1、cagA、iceAl陽性的Hp臨床分離株,每周一次,連續(xù)灌服5周,距末次灌胃后5w,10,15w,20w,25w,30w分6批處死小鼠,每批次5只。取標本行快速尿素酶試驗,Giemsa染色法觀察幽門螺桿菌在胃黏膜上的定植情況,HE染色觀察小鼠胃黏膜的病理變化。結果：對照組小鼠的胃竇、胃體及十二指腸粘膜的尿素酶試驗,Giemsa染色結果均陰性,模型組在距末次灌胃后5w, 10w,15w,20w,25w,30w幽門螺桿菌定植率分60%、80%、100%、100%、100%、100%。至20w時模型組開始出現(xiàn)萎縮性炎癥改變,至30w結束時模型組慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸化、異型增生、胃癌的發(fā)生率分別為100%、60%、0%、0%、0%。結論：本實驗成功建立了幽門螺桿菌vacAS1、cagA、iceA1陽性的國內流行株感染C57BL/6小鼠的模型,并明確了其感染小鼠后各階段的胃黏膜病理改變。
【關鍵詞】：幽門螺桿菌 中國流行株 動物模型
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R573;R-332
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 引言12-15
• 材料和方法15-24
• 結果24-26
• 討論26-29
• 結論29-30
• 參考文獻30-34
• 綜述34-42
• 參考文獻39-42
• 作者簡歷42

【參考文獻】

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1 侯鵬,許國銘,龔燕芳,屠振興,李兆申,紀徐淮;上海人幽門螺桿菌vac A基因表型與相關胃腸疾病[J];中華內科雜志;1999年11期

  本文關鍵詞：幽門螺桿菌國內流行株動物模型的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：298839