本文關(guān)鍵詞：幽門(mén)螺桿菌國(guó)內(nèi)流行株動(dòng)物模型的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景：目前研究幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)在胃炎、胃潰瘍及胃癌等疾病中的致病機(jī)制的主要方式是建立動(dòng)物感染Hp的模型,模擬Hp在人體內(nèi)的致病機(jī)制�，F(xiàn)在國(guó)外Hp感染動(dòng)物模型建立的技術(shù)相對(duì)成熟。人們成功的從不同動(dòng)物及人胃中分離出多種螺桿菌,比如貓胃中分離出貓螺旋桿菌(Helicobacter felis,Hf)等。1997年Lee等人從臨床分離出幽門(mén)螺桿菌悉尼株(Helicobacter pylori Sydney strain 1 SS1),此菌株能長(zhǎng)期有效的定植在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胃中,并成功的在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胃中產(chǎn)生慢性炎癥,萎縮性胃炎,腸上皮化生及不典型增生等病理變化�，F(xiàn)在SS1菌株作為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株,被廣泛的應(yīng)用到動(dòng)物建模中。用來(lái)建立Hp感染模型的動(dòng)物種類有很多,如沙鼠、小鼠、大鼠、豚鼠、貓、無(wú)菌豬、恒河猴等,其中一些動(dòng)物因價(jià)格昂貴、飼養(yǎng)條件高等原因限制其在試驗(yàn)中的廣泛應(yīng)用,目前蒙古沙鼠和小鼠較為常用。其中,蒙古沙鼠的Hp感染模型能較好復(fù)制Hp在人類的胃中的行為模式,但是蒙古沙鼠也有價(jià)格相對(duì)較高,飼養(yǎng)方法較復(fù)雜,能產(chǎn)生的抗體及引物有限,缺乏基因轉(zhuǎn)換的特異性等缺陷。最易建立并且容易飼養(yǎng)的嚙齒類動(dòng)物模型為小鼠,尤其是C57BL/6及FVB小鼠,能夠感染貓螺桿菌及不同種類的Hp,并表現(xiàn)為強(qiáng)烈的輔助性T細(xì)胞1(Helper T cell 1,Th1)應(yīng)答反應(yīng),而B(niǎo)ALB/c小鼠雖然負(fù)荷菌量和C57BL/6差不多,但是其感染后主要產(chǎn)生輔助性T細(xì)胞2(Helper T cell 2,Th2)細(xì)胞因子,對(duì)上皮的損傷較小�，F(xiàn)階段,SS1感染的C57BL/6小鼠已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)模型。在國(guó)內(nèi),Hp感染相關(guān)的動(dòng)物模型的建立仍處于初級(jí)階段,建模成功率較低,動(dòng)物模型多為SS1菌株感染C57BL/6小鼠或者BALB/c小鼠,還有部分蒙古沙鼠等。因?yàn)椴煌木陮?duì)于不同的宿主也會(huì)有不同的致病性,我國(guó)致病性較強(qiáng)的菌株為vac AS1、cagA、iceA1陽(yáng)性的Hp菌株,若能建立一個(gè)我國(guó)流行菌株的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物模型,對(duì)于我國(guó)Hp相關(guān)消化道疾病的研究能夠建立一個(gè)更好的研究平臺(tái)。目的：本課題通過(guò)文獻(xiàn)閱讀確立空泡細(xì)胞毒素AS1 (vacAS1)、細(xì)胞毒素相關(guān)基因A (cagA)、表皮接觸誘導(dǎo)基因A1 (iceAl)陽(yáng)性的臨床分離株為目前國(guó)內(nèi)流行株。對(duì)6株臨床HP菌株進(jìn)行基因檢測(cè),選擇vacAS1、cagA、iceAl陽(yáng)性的菌株作為致病菌。選用無(wú)特殊病原體(Specifc pathogen free,SPF)的C57BL/6小鼠為研究對(duì)象,來(lái)建立國(guó)內(nèi)幽門(mén)螺桿菌流行株的動(dòng)物模型,研究vacAS1、cagA、 iceAl陽(yáng)性的幽門(mén)螺桿菌流行株感染導(dǎo)致的小鼠胃粘膜改變,為進(jìn)一步研究致病機(jī)制、藥物治療、疫苗研究提供更好的動(dòng)物模型和研究平臺(tái)。方法：先對(duì)臨床分離的六株幽門(mén)螺桿菌行基因組檢查,確認(rèn)vacAS1、cagA、iceA1陽(yáng)性的致病株,并進(jìn)行培養(yǎng)擴(kuò)增。取60只SPF級(jí)C57BL/6小鼠,隨機(jī)分為對(duì)照組,模型組,每組30只。對(duì)照組正常飼養(yǎng),模型組經(jīng)口灌服vacAS1、cagA、iceAl陽(yáng)性的Hp臨床分離株,每周一次,連續(xù)灌服5周,距末次灌胃后5w,10,15w,20w,25w,30w分6批處死小鼠,每批次5只。取標(biāo)本行快速尿素酶試驗(yàn),Giemsa染色法觀察幽門(mén)螺桿菌在胃黏膜上的定植情況,HE染色觀察小鼠胃黏膜的病理變化。結(jié)果：對(duì)照組小鼠的胃竇、胃體及十二指腸粘膜的尿素酶試驗(yàn),Giemsa染色結(jié)果均陰性,模型組在距末次灌胃后5w, 10w,15w,20w,25w,30w幽門(mén)螺桿菌定植率分60%、80%、100%、100%、100%、100%。至20w時(shí)模型組開(kāi)始出現(xiàn)萎縮性炎癥改變,至30w結(jié)束時(shí)模型組慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、腸化、異型增生、胃癌的發(fā)生率分別為100%、60%、0%、0%、0%。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)成功建立了幽門(mén)螺桿菌vacAS1、cagA、iceA1陽(yáng)性的國(guó)內(nèi)流行株感染C57BL/6小鼠的模型,并明確了其感染小鼠后各階段的胃黏膜病理改變。
【關(guān)鍵詞】：幽門(mén)螺桿菌 中國(guó)流行株 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R573;R-332
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 引言12-15
• 材料和方法15-24
• 結(jié)果24-26
• 討論26-29
• 結(jié)論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 綜述34-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 作者簡(jiǎn)歷42

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 侯鵬,許國(guó)銘,龔燕芳,屠振興,李兆申,紀(jì)徐淮;上海人幽門(mén)螺桿菌vac A基因表型與相關(guān)胃腸疾病[J];中華內(nèi)科雜志;1999年11期

  本文關(guān)鍵詞：幽門(mén)螺桿菌國(guó)內(nèi)流行株動(dòng)物模型的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：298839