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斯氏貍殖吸蟲半胱氨酸蛋白酶cDNA克

發(fā)布時(shí)間:2021-01-11 07:05
  背景:斯氏貍殖吸蟲散在流行于我國(guó)四川、重慶等15個(gè)省市自治區(qū),給人們身體健康和國(guó)家經(jīng)濟(jì)建設(shè)造成了極大的危害。半胱氨酸蛋白酶存在于人類、寄生生物等多種動(dòng)物體內(nèi)。作為寄生蟲的主要消化酶之一,半胱氨酸蛋白酶在寄生蟲與宿主的相互關(guān)系上具有重要的作用。由于該酶在寄生蟲病的免疫診斷、疫苗及化療藥物的研制上具有廣闊的應(yīng)用前景,因而寄生蟲半胱氨酸蛋白酶正受到越來越廣泛和深入的研究。然而對(duì)于僅流行于我國(guó)的斯氏貍殖吸蟲,其半胱氨酸蛋白酶尚無相關(guān)研究。 目的:1、克隆斯氏貍殖吸蟲半胱氨酸蛋白酶cDNA,獲得其序列。2、進(jìn)行原核表達(dá),獲得表達(dá)產(chǎn)物,并檢測(cè)其免疫反應(yīng)性。3、對(duì)半胱氨酸蛋白酶在斯氏貍殖吸蟲的蟲體表達(dá)進(jìn)行組織定位。 方法:1、從四川興文縣采集溪蟹,分離斯氏貍殖吸蟲囊蚴,經(jīng)動(dòng)物感染后獲得成蟲。利用TripureTM RNA提取試劑盒提取總RNA,進(jìn)行RT-PCR。PCR中所用引物為根據(jù)相關(guān)蟲種半胱氨酸蛋白酶保守氨基酸序列設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)并引物。擴(kuò)增片段純化后,克隆入pUCm-T載體并測(cè)序,然后利用DNASIS程序推導(dǎo)其氨基酸序列,并與其它相關(guān)蟲種半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列進(jìn)行同... 

【文章來源】:中國(guó)人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】:62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
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英文摘要
中文摘要
論文正文 斯氏貍殖吸蟲半胱氨酸蛋白酶cDNA克隆、表達(dá)及蟲體組織定位的研究
    前言
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    致謝
    照片
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述一 半胱氨酸蛋白酶在寄生蟲與宿主的相互關(guān)系中的作用
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述二 半胱氨酸蛋白酶在寄生蟲病的免疫診斷和治療中的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間總結(jié)的論文



本文編號(hào):2970322

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