環(huán)狀10-23結(jié)構(gòu)脫氧核酶的體內(nèi)外活性研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-09 08:02
脫氧核酶(Deoxyribozyme, DNAzyme, DNA enzyme),又稱DNA酶或酶性DNA,是具有催化活性的DNA分子。脫氧核酶是繼蛋白質(zhì)酶、核酶之后生物催化劑家族的又一新成員。與前兩者不同的是,自然界中似乎不存在天然的脫氧核酶,目前發(fā)現(xiàn)的脫氧核酶都是通過(guò)體外選擇方法(SELEX)得到的。自Breaker等1994年首次報(bào)道了具有RNA切割DNA分子以來(lái),人們通過(guò)體外篩選得到了多種具有催化功能的DNA分子。與核酶相比,脫氧核酶具有分子小、特異性好、催化效率高等特點(diǎn),在基因治療、疾病診斷及分子生物學(xué)分析工具等方面具有潛在應(yīng)用價(jià)值。目前研究最多也最具應(yīng)用價(jià)值的是10-23結(jié)構(gòu)脫氧核酶,該結(jié)構(gòu)由15個(gè)脫氧核苷酸組成的保守序列構(gòu)成其催化活性中心,兩側(cè)各連接一段靈活的底物結(jié)合序列。從理論上只需調(diào)整其底物識(shí)別區(qū)的核苷酸組成。此脫氧核酶可切割任何含AU的RNA分子。這一特性使之在基因治療(反義療法)方面有巨大應(yīng)用潛力,也就是意味著針對(duì)任何一種致病基因的mRNA,可以設(shè)計(jì)出具有高度特異性的脫氧核酶來(lái)抑制有害基因的表達(dá),從而達(dá)到基因治療的目的。本研究選用的10-23結(jié)構(gòu)脫氧核酶是Sant...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:39 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
提 要
概述
1.1 概述
1.2 脫氧核酶的結(jié)構(gòu)
1.3 脫氧核酶的應(yīng)用
1.4 本研究的意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 儀器與試劑
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 試劑與溶液的配制
2.1.3 酶和試劑及來(lái)源
第三章 實(shí)驗(yàn)方法及原理
3.1 實(shí)驗(yàn)原理與流程
3.1.1 實(shí)驗(yàn)原理
3.1.2 實(shí)驗(yàn)流程
3.2 環(huán)狀脫氧核酶體外切割反應(yīng)
3.2.1 RNA底物設(shè)計(jì)合成
3.2.2 底物的放射性標(biāo)記
3.2.3 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割反應(yīng)
3.3 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)復(fù)制與活性測(cè)定
第四章 結(jié)果
4.1 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割活性
4.2 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)活性及復(fù)制
第五章 討論和總結(jié)
5.1 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割分析
5.2 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)活性及復(fù)制分析
5.3 總結(jié)
參 考 文 獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
致 謝
摘 要
ABSTRACT
本文編號(hào):2966274
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:39 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
提 要
概述
1.1 概述
1.2 脫氧核酶的結(jié)構(gòu)
1.3 脫氧核酶的應(yīng)用
1.4 本研究的意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 儀器與試劑
2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.2 試劑與溶液的配制
2.1.3 酶和試劑及來(lái)源
第三章 實(shí)驗(yàn)方法及原理
3.1 實(shí)驗(yàn)原理與流程
3.1.1 實(shí)驗(yàn)原理
3.1.2 實(shí)驗(yàn)流程
3.2 環(huán)狀脫氧核酶體外切割反應(yīng)
3.2.1 RNA底物設(shè)計(jì)合成
3.2.2 底物的放射性標(biāo)記
3.2.3 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割反應(yīng)
3.3 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)復(fù)制與活性測(cè)定
第四章 結(jié)果
4.1 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割活性
4.2 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)活性及復(fù)制
第五章 討論和總結(jié)
5.1 環(huán)狀脫氧核酶的體外切割分析
5.2 環(huán)狀脫氧核酶的體內(nèi)活性及復(fù)制分析
5.3 總結(jié)
參 考 文 獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的論文
致 謝
摘 要
ABSTRACT
本文編號(hào):2966274
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