發(fā)布時間：2021-01-05 09:46

　　目的:制備人IgGγ鏈（重鏈）單克隆抗體及其雜交瘤細胞,并對其研究和鑒定。將其應(yīng)用于人源抗體的擴大培養(yǎng),分離純化以及生物制品質(zhì)量控制中,建立起一種方便,快速,特異性強,重復(fù)性好的定量檢測方法。 方法:分離純化人血清中的IgG以最佳免疫途徑免疫雌性Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞SP2/0在融合劑聚乙二醇（PEG,MW4000）作用下融合,篩選并建立人IgGγ鏈單克隆抗體（McAb 612）雜交瘤細胞株（MKIG12）。以人IgGγ鏈（重鏈）單克隆抗體包被酶標板,以辣根過氧化物酶標記人IgGγ鏈（重鏈）單克隆抗體為已知抗體兼顯色抗體,建立了檢測人源抗體的雙抗夾心ELISA法。 結(jié)果:經(jīng)SDS-PAGE證實純化人IgG由輕鏈26.44 KD（1鏈24KD,κ型和λ型）和重鏈52.73 KD（h鏈即γ鏈,50～55KD）兩亞單位組成。雜交瘤MKIG12經(jīng)鑒定,具有以下特征:①雜交瘤MKIG12連續(xù)傳代120d,抗體分泌穩(wěn)定:②染色體數(shù)目較多（100條）, 

【文章來源】：四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人I姊標準曲線

圖2人I邪蛋白AsPeharose親和層析圖譜Fig2ProteinAsePharoseaffinityehro.atogrP8hyofhmunal邪4.2人I邪的SDS一APGE分析將標準蛋白，人gIG的鹽析液，人gIG離子交換純化物，人IgG親和層析純化物同時進行SDS一PAGE分析，如圖3，alnel為

4.2人I邪的SDS一APGE分析將標準蛋白，人gIG的鹽析液，人gIG離子交換純化物，人IgG親和層析純化物同時進行SDS一PAGE分析，如圖3，alnel為圖3人I夠的SDS一AGE分析圖譜Fig3SDS一PAGEnaalyzingprofileofhu.anIGglanel:ProteinWMmarker1ozne止:(NH4):S氏prieiPitationlane3:Iron一Exehangeehromatographyl、一ne!:一f，f1nityehromatography

【參考文獻】：
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